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Samly

金虫 (初入文坛)

[求助] 求近几年膜蛋白的研究热点!!!

各位大神,我想申请香港的研究生,需要写一个research proposal……
我本科学药物制剂,最近刚做完毕设,是做药物筛选的,用的方法是配体垂钓法,就是把蛋白质固定到磁珠上,然后跟天然药物的提取物孵育,收集上清液过HPLC, 磁珠用乙腈洗脱,洗脱液过HPLC,分析出蛋白跟那些单体结合了(大概是这样……)
目前我的想法是:提取分离膜蛋白——蛋白固定——加入天然药物的提取物孵育——分析
所以想了解一下近几年膜蛋白的研究热点,比如有哪些蛋白啦,作用是什么啦
另外我的想法有什么不足的也请大家指出哈~~
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:24:17
gyesang: 回帖置顶 2013-10-24 00:24:23
随便说一点,你自己分析分析:
1. 你想提取膜蛋白固定磁珠。为何取膜蛋白,如何避免胞内蛋白?靶标蛋白是细胞范围分布的,并非只在膜上。
2. 天然药物提取物是一个非常杂的成分,如何分析结合上还是没有结合你蛋白上,结合上的是什么也无法确认。
3. 结合在你磁珠上的蛋白也是个非常杂的体系,能够结合多少配体是未知,结合多少种更是未知。
4. 天然药物分子与蛋白的作用力是非常弱的,一般有活性的天然产物其活性都在微摩尔级别,除非你能筛到共价结合的,非共价结合的,我觉得你垂钓不到。
5. 如何确证是哪个分子结合的哪一种蛋白。
6. 如何排除非特异性的结合。
4楼2013-10-22 14:32:03
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查看全部 7 个回答

临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-10-22 09:27:51
看看施一公的文章呗
2楼2013-10-21 21:02:25
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Samly

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 临风7071 at 2013-10-21 21:02:25
看看施一公的文章呗

茫茫文海啊……还是一点头绪都没有……那你觉得我上面说的那个研究的方向怎么样?
3楼2013-10-22 10:40:45
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Samly

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-10-22 14:32:03
随便说一点,你自己分析分析:
1. 你想提取膜蛋白固定磁珠。为何取膜蛋白,如何避免胞内蛋白?靶标蛋白是细胞范围分布的,并非只在膜上。
2. 天然药物提取物是一个非常杂的成分,如何分析结合上还是没有结合你蛋白 ...

非常感谢你指出的这些问题!除了第二个我觉得可以解决之外其他我着实都没有考虑到……
对于这些问题,我觉得只能通过看文献看看有没有解决的方案啦……但是从哪方面下手找文献又完全没有头绪TAT
我打个比方吧,总有已经从膜上已经研究的比较透彻的了蛋白吧?是不是可以通过逆转录、基因工程之类的,大量的得到蛋白的单体,在把蛋白通过共价结合到磁珠上,在配体垂钓? 当然为了提高实验的成功率,中药的选择当然也很关键,可以通过查阅文献看看它主要有什么功效,可能会跟这个蛋白有作用,再去进行实验。
也不知道我有没有表达清楚……
所以……求大神推荐推荐膜蛋白的研究热点之类的?
最近准备看施一公的文章,但是又觉得太高端了……
5楼2013-10-23 10:46:27
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