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求近几年膜蛋白的研究热点！！！
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各位大神，我想申请香港的研究生，需要写一个research proposal…… 我本科学药物制剂，最近刚做完毕设，是做药物筛选的，用的方法是配体垂钓法，就是把蛋白质固定到磁珠上，然后跟天然药物的提取物孵育，收集上清液过HPLC, 磁珠用乙腈洗脱，洗脱液过HPLC，分析出蛋白跟那些单体结合了（大概是这样……） 目前我的想法是：提取分离膜蛋白——蛋白固定——加入天然药物的提取物孵育——分析 所以想了解一下近几年膜蛋白的研究热点，比如有哪些蛋白啦，作用是什么啦 另外我的想法有什么不足的也请大家指出哈~~ |
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临风7071
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2楼2013-10-21 21:02:25
3楼2013-10-22 10:40:45
ynkuaile
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随便说一点，你自己分析分析： 1. 你想提取膜蛋白固定磁珠。为何取膜蛋白，如何避免胞内蛋白？靶标蛋白是细胞范围分布的，并非只在膜上。 2. 天然药物提取物是一个非常杂的成分，如何分析结合上还是没有结合你蛋白上，结合上的是什么也无法确认。 3. 结合在你磁珠上的蛋白也是个非常杂的体系，能够结合多少配体是未知，结合多少种更是未知。 4. 天然药物分子与蛋白的作用力是非常弱的，一般有活性的天然产物其活性都在微摩尔级别，除非你能筛到共价结合的，非共价结合的，我觉得你垂钓不到。 5. 如何确证是哪个分子结合的哪一种蛋白。 6. 如何排除非特异性的结合。 |
4楼2013-10-22 14:32:03
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非常感谢你指出的这些问题！除了第二个我觉得可以解决之外其他我着实都没有考虑到…… 对于这些问题，我觉得只能通过看文献看看有没有解决的方案啦……但是从哪方面下手找文献又完全没有头绪TAT 我打个比方吧，总有已经从膜上已经研究的比较透彻的了蛋白吧？是不是可以通过逆转录、基因工程之类的，大量的得到蛋白的单体，在把蛋白通过共价结合到磁珠上，在配体垂钓？ 当然为了提高实验的成功率，中药的选择当然也很关键，可以通过查阅文献看看它主要有什么功效，可能会跟这个蛋白有作用，再去进行实验。 也不知道我有没有表达清楚…… 所以……求大神推荐推荐膜蛋白的研究热点之类的？ 最近准备看施一公的文章，但是又觉得太高端了…… |
5楼2013-10-23 10:46:27
ynkuaile
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施一公是做结构的，不是做药物筛选的。他做的不是靶标蛋白，你要筛药，首先确定，你这个蛋白是否是靶标蛋白或者是潜在的靶标蛋白。如果不是靶蛋白，筛出来了又有什么用呢？我觉得你可以把范围缩小点，确定靶蛋白去找活性小分子，或者确定小分子去找你的蛋白。 |
6楼2013-10-23 13:08:06
7楼2013-10-23 18:41:15
