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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)


[交流] 50bp的片段与双酶切后的载体(5Kb)连接,效率如何?

求助:50bp的片段与双酶切后的载体(5Kb)连接,用thermo的T4连接酶 22度连接3h,后转化大肠杆菌,竟然长出了很多很多菌落。是载体自连吗?还是连接效率高?
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xieya1234_0

银虫 (小有名气)


你50的片段如何得到,能否保证酶切位点的完整性
10楼2013-10-29 11:17:07
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anjingde

铜虫 (小有名气)



jonathan1983(金币+1): 谢谢参与
载体自连的概率非常非常大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-10-22 09:38:48
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)


看来大家都缺钱啊,不管穷人富人
9楼2013-10-28 16:25:57
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jonathan1983

铁虫 (小有名气)


引用回帖:
10楼: Originally posted by xieya1234_0 at 2013-10-29 11:17:07
你50的片段如何得到,能否保证酶切位点的完整性

自己设计了两条链(末端形成粘性末端),由公司合成,二者先退火、再缓慢降温形成杂交双链。这样应该可行吧?
11楼2013-10-29 15:04:41
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shigua6楼
2013-10-23 10:32   回复  
jonathan1983(金币+1): 谢谢参与
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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