应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】二维电泳找诱导凋亡的人乳腺癌细胞与正常癌细胞的蛋白差异
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 919  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jysw_wx

新虫 (初入文坛)

[求助] 【交流/求助】二维电泳找诱导凋亡的人乳腺癌细胞与正常癌细胞的蛋白差异

各位前辈高手，本实验室新手要做诱导凋亡后乳腺癌细胞与正常的癌细胞差异蛋白的表达，需要用二维电泳（实验室新进仪器，都不会用），--------------求教1.第二向需要用多大规格的胶才能区分蛋白呀。2。需要用提的细胞全蛋白液先跑第一项吧，大概要怎么摸条件，是不是很复杂？-----------------新手求教，还请多多指教，不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-15 14:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-15 15:57:33
我也打算做二维凝胶电泳，咨询过老师一些问题，试着回答一下。首先你先用蛋白跑Western，做个预实验，然后在选择跑二维电泳的胶条PH。貌似跑二维电泳是比较复杂，以后多交流
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-15 14:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jysw_wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-15 14:43:42
我也打算做二维凝胶电泳，咨询过老师一些问题，试着回答一下。首先你先用蛋白跑Western，做个预实验，然后在选择跑二维电泳的胶条PH。貌似跑二维电泳是比较复杂，以后多交流

是的，自己摸索太费劲了，多交流哈。多谢了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-15 16:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:37
你的是什么仪器呀，新仪器应该有工程师给培训吧，而且应该也有使用手册的
找表达量的差异为什么要做Western？正常的和病变的都跑双向，软件一分析就都出来了
难道是想做完双向然后接Western？
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-16 14:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:42
你实验室的胶规格是多大的？11cm、13cm、18cm、24cm？胶条越长分辨率越高
pH值的话既然做总蛋白，先选范围广的呗，等做完了再根据结果看适不适合呗
双向电泳一向和二向是整体的，只跑一向你也看不出什么东西，聚焦条件根据你仪器，胶条长度选择，先找说明书按照推荐的做一次，不行在调整，文献有很多，多看看做做就会了
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-16 14:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jysw_wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by DBWJ at 2013-10-16 14:45:57
你实验室的胶规格是多大的？11cm、13cm、18cm、24cm？胶条越长分辨率越高
pH值的话既然做总蛋白，先选范围广的呗，等做完了再根据结果看适不适合呗
双向电泳一向和二向是整体的，只跑一向你也看不出什么东西，聚焦 ...

多谢指点。就先打算把凋亡的和正常的都跑二维再对比。我们的新仪器是GE的，但是只能跑7cm，11cm的的吧，大的好想没买配件，只能用旧伯乐的能跑17cm，，再大的还没有，是不是小胶条的不适合做这样的分析。大神能不能指点一下后面是再做免疫印记还是上质谱，不过现在还做不到那么远吧。再次感谢
赞一下 回复此楼
6楼2013-10-16 17:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:49
jysw_wx: 金币+10, ★有帮助 2013-10-18 12:32:27
7CM和11CM分离效果不是特别的好的，不过如果你样品复杂度不是那么高的话可以用的
后面免疫印迹和质谱就得看你实验的要求了，一般的话都是做质谱鉴定的，免疫印迹的话胶越大越不好做
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-17 10:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jysw_wx 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 抱歉 +4 田洪有 2026-03-30 4/200 2026-03-30 21:26 by mumin1990
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
[考研] 309求调剂 +15 谁不是少年 2026-03-29 15/750 2026-03-30 19:28 by 2026材料调剂
[考研] 295材料工程专硕求调剂 +10 1428151015 2026-03-27 10/500 2026-03-30 19:00 by 源_2020
[考研] 292求调剂 +13 是妍子也是研子 2026-03-30 13/650 2026-03-30 18:01 by 小徐0109
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 070300化学354求调剂 +7 101次希望 2026-03-28 7/350 2026-03-30 13:22 by Iveryant
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考研] 265求调剂11408 +3 刘小鹿lu 2026-03-27 3/150 2026-03-27 20:53 by nihaoar
[考研] 292求调剂 +4 求求了收下我吧� 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:37 by zhshch
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭