应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【交流/求助】二维电泳找诱导凋亡的人乳腺癌细胞与正常癌细胞的蛋白差异
71/1返回列表
查看: 906  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jysw_wx

新虫 (初入文坛)

[求助] 【交流/求助】二维电泳找诱导凋亡的人乳腺癌细胞与正常癌细胞的蛋白差异

各位前辈高手，本实验室新手要做诱导凋亡后乳腺癌细胞与正常的癌细胞差异蛋白的表达，需要用二维电泳（实验室新进仪器，都不会用），--------------求教1.第二向需要用多大规格的胶才能区分蛋白呀。2。需要用提的细胞全蛋白液先跑第一项吧，大概要怎么摸条件，是不是很复杂？-----------------新手求教，还请多多指教，不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-15 14:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-15 15:57:33
我也打算做二维凝胶电泳，咨询过老师一些问题，试着回答一下。首先你先用蛋白跑Western，做个预实验，然后在选择跑二维电泳的胶条PH。貌似跑二维电泳是比较复杂，以后多交流
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-15 14:43:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jysw_wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-15 14:43:42
我也打算做二维凝胶电泳，咨询过老师一些问题，试着回答一下。首先你先用蛋白跑Western，做个预实验，然后在选择跑二维电泳的胶条PH。貌似跑二维电泳是比较复杂，以后多交流

是的，自己摸索太费劲了，多交流哈。多谢了。
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-15 16:59:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:37
你的是什么仪器呀，新仪器应该有工程师给培训吧，而且应该也有使用手册的
找表达量的差异为什么要做Western？正常的和病变的都跑双向，软件一分析就都出来了
难道是想做完双向然后接Western？
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-16 14:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:42
你实验室的胶规格是多大的？11cm、13cm、18cm、24cm？胶条越长分辨率越高
pH值的话既然做总蛋白，先选范围广的呗，等做完了再根据结果看适不适合呗
双向电泳一向和二向是整体的，只跑一向你也看不出什么东西，聚焦条件根据你仪器，胶条长度选择，先找说明书按照推荐的做一次，不行在调整，文献有很多，多看看做做就会了
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-16 14:45:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jysw_wx

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by DBWJ at 2013-10-16 14:45:57
你实验室的胶规格是多大的？11cm、13cm、18cm、24cm？胶条越长分辨率越高
pH值的话既然做总蛋白，先选范围广的呗，等做完了再根据结果看适不适合呗
双向电泳一向和二向是整体的，只跑一向你也看不出什么东西，聚焦 ...

多谢指点。就先打算把凋亡的和正常的都跑二维再对比。我们的新仪器是GE的，但是只能跑7cm，11cm的的吧，大的好想没买配件，只能用旧伯乐的能跑17cm，，再大的还没有，是不是小胶条的不适合做这样的分析。大神能不能指点一下后面是再做免疫印记还是上质谱，不过现在还做不到那么远吧。再次感谢
赞一下 回复此楼
6楼2013-10-16 17:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

DBWJ

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-17 10:09:49
jysw_wx: 金币+10, ★有帮助 2013-10-18 12:32:27
7CM和11CM分离效果不是特别的好的，不过如果你样品复杂度不是那么高的话可以用的
后面免疫印迹和质谱就得看你实验的要求了，一般的话都是做质谱鉴定的，免疫印迹的话胶越大越不好做
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-17 10:09:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jysw_wx 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂院校信息 +4 CX 330 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:48 by ms629
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +14 曦熙兮 2026-03-15 14/700 2026-03-21 19:12 by ColorlessPI
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +6 怀瑾握瑜l 2026-03-20 6/300 2026-03-20 20:30 by 学员8dgXkO
[考博] 招收博士1-2人 +3 QGZDSYS 2026-03-18 3/150 2026-03-20 11:58 by 呱呱呱呱叫
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭