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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶的筛选
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hu785100673

金虫 (初入文坛)

[求助] 酶的筛选

现在想用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶等几种蛋白酶来水解蛋白制备多肽，怎么确定哪种酶更好啊？木瓜蛋白酶、胰蛋白酶是固体酶，碱性蛋白酶是液体酶添加酶量啊以确保三种酶加的是一样？如果测酶含量的话，但感觉几种酶都不是纯酶，误差较大。还有什么什么好的方法吗？
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1楼 2013-10-12 17:03:36
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yuhuaing

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
hu785100673: 金币+2, ★★★很有帮助, 我觉得用酶的比活力做可能更好 2013-10-17 08:41:19
引用回帖:
3楼: Originally posted by hu785100673 at 2013-10-14 09:02:55
那个怎么确定啊，一个是液体酶两个是固体酶？...

用酶和底物的摩尔浓度（mol/ml)之比,对于固体酶制剂可以用其对应的缓冲液（注意选择合适的缓冲液的种类及缓冲pH）进行溶解，制备液体酶。
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4楼2013-10-16 12:46:18
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yuhuaing

新虫 (初入文坛)
可否考虑用相同的[E]/[S]，最终以检测水解产物的方法评价各酶的水解效率高低。
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2楼2013-10-13 23:51:42
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hu785100673

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuhuaing at 2013-10-13 23:51:42
可否考虑用相同的/，最终以检测水解产物的方法评价各酶的水解效率高低。

那个[E]怎么确定啊，一个是液体酶两个是固体酶？
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3楼2013-10-14 09:02:55
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
hu785100673: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-17 08:42:25
酶的量是用活力衡量的，1g的A酶和1kg的B酶的活力相同，二者酶的量相同（同种酶），比活力差1000倍，前者高。不同的酶制品可以比比活力，比活力高的酶含量高。如果是纯酶的溶液可以蛋白定量。一般酶制剂会给浓度或酶活总量吧。如果酶活定义差异不大就同一按一定U数做。也有用总蛋白含量统一的，例如1mg蛋白的催化能力（小分子模拟酶经常这样和天然酶比，要不单分子催化能力差距太大）
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5楼2013-10-16 14:50:32
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