DNA提取时有RNA污染 - 分子生物 - 综合其他 - 第2页小木虫论坛-学术科研互动平台

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wangliually

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10楼: Originally posted by xl_dut at 2013-10-12 11:04:42
敢问楼主用的是什么Marker，Marker都没跑开基因组DNA是不会跑出去的。另外，跑在最前端的是小片段的RNA及寡核苷酸，不用担心。而且有溴酚蓝指示剂，大概等到指示剂跑到1/4~3/4处即可。...

marker 用的是 hind λ Ⅲ.明白了我下回试试看，谢谢

11楼2013-10-12 16:12:15

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wangliually

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3楼: Originally posted by 淘淘279 at 2013-10-11 13:38:28
看你的情况应该加Rna酶
传统的酚氯仿方法中去除RNA一般在前三个溶液里加入RNA酶。
我们一般在溶液一里面加入RNA酶。

学习了，多谢

12楼2013-10-12 16:13:18

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13楼2013-10-12 16:13:34

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10楼: Originally posted by xl_dut at 2013-10-12 11:04:42
敢问楼主用的是什么Marker，Marker都没跑开基因组DNA是不会跑出去的。另外，跑在最前端的是小片段的RNA及寡核苷酸，不用担心。而且有溴酚蓝指示剂，大概等到指示剂跑到1/4~3/4处即可。...

对了，我上面的图就是溴酚蓝已经跑到剩下的空间不足1/4了啊，marker没跑开是不是因为我没有预热啊。

14楼2013-10-12 16:22:19

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xl_dut

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14楼: Originally posted by wangliually at 2013-10-12 16:22:19
对了，我上面的图就是溴酚蓝已经跑到剩下的空间不足1/4了啊，marker没跑开是不是因为我没有预热啊。...

15楼2013-10-12 20:07:56

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王者归来001

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提取DNA的少量RNA基本上不影响后续的实验，只是图片不还看罢了，泳道里的白色是因为DNA量太大滞留的原因

坚持不懈,终会成功!

16楼2013-10-12 21:46:04

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16楼: Originally posted by 王者归来001 at 2013-10-12 21:46:04
提取DNA的少量RNA基本上不影响后续的实验，只是图片不还看罢了，泳道里的白色是因为DNA量太大滞留的原因

有人跟我说可能是蛋白的污染，有这种可能吗?我怎样排除这中可能性呢？

17楼2013-10-13 16:17:40

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18楼2013-10-13 16:31:55

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cicelyzh

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18楼: Originally posted by wangliually at 2013-10-13 16:31:55
那我点样打的亮斑到底是基因组残留还是蛋白质污染呢？我该怎么判断...

你要提的不是基因组DNA吗？点样孔处是核酸蛋白复合物，说明样品的蛋白除得不是很干净。

19楼2013-10-13 16:52:54

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shui_hanliu

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溶解的时候加一点RNA酶就行了

20楼2013-10-13 22:23:14

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