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wangliually

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[求助] DNA提取时有RNA污染

我提取植物的DNA出现严重的RNA污染，这是为什么？我采用的是NY1485-4-2010的CTAB有机法，没有加RNA酶。请问RNA酶是必须加的吗？传统的酚氯仿方法中去除RNA的是哪一步？采用国标的方法如果不加RNA酶的话可否除去RNA污染？

20131009有机法.JPG

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1楼 2013-10-11 11:02:35

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wangliually

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引用回帖:

16楼: Originally posted by 王者归来001 at 2013-10-12 21:46:04
提取DNA的少量RNA基本上不影响后续的实验，只是图片不还看罢了，泳道里的白色是因为DNA量太大滞留的原因

有人跟我说可能是蛋白的污染，有这种可能吗?我怎样排除这中可能性呢？

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17楼2013-10-13 16:17:40

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xl_dut

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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wangliually: 金币+5, ★有帮助 2013-10-11 21:35:57

加入适量的RNA酶，37℃消化30-45min就好了！
传统的碱裂解法提取DNA时也需要加入一定量的RNase的，虽然碱性条件下RNA会发生自动降解，但细胞内的RNA丰度较高，还是需要加入一定量的RNase的。试剂盒提供的方法一般是在溶液I中加入少量RNase，可以取得较好的去除RNA效果，也可以在提取的最后一步加入RNase。

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