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wangliually

新虫 (初入文坛)

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[求助] DNA提取时有RNA污染

我提取植物的DNA出现严重的RNA污染，这是为什么？我采用的是NY1485-4-2010的CTAB有机法，没有加RNA酶。请问RNA酶是必须加的吗？传统的酚氯仿方法中去除RNA的是哪一步？采用国标的方法如果不加RNA酶的话可否除去RNA污染？

20131009有机法.JPG

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1楼 2013-10-11 11:02:35

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xl_dut

木虫 (正式写手)

引用回帖:

14楼: Originally posted by wangliually at 2013-10-12 16:22:19
对了，我上面的图就是溴酚蓝已经跑到剩下的空间不足1/4了啊，marker没跑开是不是因为我没有预热啊。...

15楼2013-10-12 20:07:56

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xl_dut

木虫 (正式写手)

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专业: 微生物遗传育种学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wangliually: 金币+5, ★有帮助 2013-10-11 21:35:57

加入适量的RNA酶，37℃消化30-45min就好了！
传统的碱裂解法提取DNA时也需要加入一定量的RNase的，虽然碱性条件下RNA会发生自动降解，但细胞内的RNA丰度较高，还是需要加入一定量的RNase的。试剂盒提供的方法一般是在溶液I中加入少量RNase，可以取得较好的去除RNA效果，也可以在提取的最后一步加入RNase。