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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切条带很亮，胶回收完了就没条带了，求大神指教
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科技广场

铜虫 (小有名气)

[求助] 酶切条带很亮，胶回收完了就没条带了，求大神指教

酶切条带很亮，胶回收完了就没条带了，求大神指教，谢谢？
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1楼 2013-09-30 13:14:03
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般情况下酶切条带很亮说明DNA浓度还是很高的，当然这还跟EB浓度以及照胶时间有关，胶回收以后不亮，说明可能是回收的过程出了问题，比如说最后一步洗脱的时候时间过短，我以前就遇到过这样的问题；至于说跑胶弥散，大部分应该是操作有问题，你可以重新配一下胶试试。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
13楼2013-10-11 10:24:47
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-30 17:08:07
酶切条带很亮不足以说明你的片段浓度很高，要看你紫外激发时间长短了。最好用仪器进行浓度测定，而不是跑胶看亮度来定量。一般胶回收试剂盒会说回收效率有80%-90%左右，但是用了这么多种试剂盒这么多年的胶回收经验感觉收率也就20%-50%。
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2楼2013-09-30 13:53:28
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pengpeng7196

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-30 17:11:02
看不到条带也可以继续往下做试试，只要确定柱子没有问题，回收回来的有你要的东西，继续往下做应该一样可以做出来，分子生物学操作有时候不是以量取胜撒
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不断丰富自己
3楼2013-09-30 14:20:46
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科技广场

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pengpeng7196 at 2013-09-30 14:20:46
看不到条带也可以继续往下做试试，只要确定柱子没有问题，回收回来的有你要的东西，继续往下做应该一样可以做出来，分子生物学操作有时候不是以量取胜撒

胶回收后跑出的条带总是弥散状？不知道什么原因
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4楼2013-09-30 14:23:42
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