应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » HeLa细胞传代后90% 死亡，求解
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3263  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

挫人小鱼

新虫 (小有名气)

[求助] HeLa细胞传代后90% 死亡，求解

本人菜鸟，才开始学养细胞。

替别人传 细胞，结果HeLa细胞状态好，长的太快，本是第二天下午传的，结果没时间，第三天中午传的。因为细胞长的很满，不过也有很多死细胞，就一个大瓶传了一个中瓶，两个大瓶。镜检，三个瓶子中细胞浓度很大。根据以前的经验，长一天绝对很满。结果第四天早上，也就是今天早晨看的时候，90%的细胞飘起来了，只有10%细胞贴壁生长，而且状态不好。
这次的培养基是新配的，初步认为可能是新配置的培养基没有混合均匀，因为我加入FBS和双抗之后，只是左右晃动几下培养基，10min之后开始用这个培养基（配置培养基后才开始消化细胞），不知道是不是这个原因。
双抗是找别人借的，人家说浓度是100 X 的。DMEM是新的，FBS是用过的，冰箱放置了约3天吧。

其次是前天传了一批自己养的HeLa细胞，培养基是以前的，昨天看还是可以的，死细胞不多，只是贴壁细胞不多，但是今天早上看的时候，也是很多死细胞，状态不好，不知道什么原因。

不知道是不是污染导致这些细胞离我而去？求大侠们解答。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-29 12:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

挫人小鱼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 梦幻未碎 at 2013-09-29 17:01:58
亲！细胞消化只要肉眼可见培养瓶底部细胞脱落就可以加培养基进行轻柔吹打，一般消化在1~2min，具体以观察为准。消化8分钟居然还能有10％活细胞真的是奇迹了。。。。
培养液里面有没有脏脏的感觉？

不好意思，国庆回家。
赞一下 回复此楼
10楼2013-10-07 15:00:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

arystal

金虫 (小有名气)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 20:25:18
会不会是胰酶消化的时间过久了；或者是吹散成单细胞悬液的时候，力道过大了，影响到细胞状态了？
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-29 13:46:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

挫人小鱼

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by arystal at 2013-09-29 13:46:27
会不会是胰酶消化的时间过久了；或者是吹散成单细胞悬液的时候，力道过大了，影响到细胞状态了？

胰酶消化时间是8min，有些细胞漂浮起来了才停止消化；我以为是细胞长老了，所以消化时间较久。
吹打细胞貌似是一直这么吹的，以前的还好。

听实验室师妹说可能是FBS不够，导致细胞饿死了。不知道是不是。
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-29 16:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦幻未碎

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 20:25:27
gyesang: 回帖置顶 2013-09-29 20:25:32
挫人小鱼: 金币+3 2013-10-07 17:46:48
亲！细胞消化只要肉眼可见培养瓶底部细胞脱落就可以加培养基进行轻柔吹打，一般消化在1~2min，具体以观察为准。消化8分钟居然还能有10％活细胞真的是奇迹了。。。。
培养液里面有没有脏脏的感觉？
赞一下 回复此楼
开阔
4楼2013-09-29 17:01:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +5 路痴小琪 2026-03-27 5/250 2026-03-27 13:09 by yhmsz
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +10 77chaselx 2026-03-20 10/500 2026-03-27 11:28 by wangjy2002
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 8/400 2026-03-27 11:24 by 丹青奶盖
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 305求调剂 +4 哇卢卡库 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:58 by sanrepian
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 打过很多竞赛，085406控制工程300分，求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭