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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 作物 » 蒽酮比色法测水稻幼苗可溶性糖、淀粉的含量
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独行尊者

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by nkylgx at 2014-05-13 16:19:25
可溶性总糖的测定（蒽酮比色法）
摘要： 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在  ...

想问下1.硫酸蒽酮试怎么加的，用的5ml的枪，可是挂壁时间长，吸取和打出都比较慢，影响整体试验结果么，
2.蒽酮是避光的么，
3.硫酸加入蒽酮过量一点没什么问题吧，领导好像这么说的，硫酸蒽酮保证硫酸足够就行
4.水浴的时候放多少水，淹没液面就行了么？
5.我这水浴是二十分钟，看网上说十分钟的比较多，如果忘记计时或者时间到了没取出来会有多大影响，值是会偏高还是低，看网上说有新的反应发生，具体什么反应还没查到
6.还有你的思考题，标准曲线制作还有哪些要注意的，
谢谢了，最近做的几次结果都不是很好
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博学笃行，厚德载物
11楼2014-10-14 18:31:55
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ffww123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 314584069 at 2013-09-28 08:12:38
蒽酮比色法
1、试剂
(1)．1%蔗糖标准液  将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重，精确称取1.000g。加少量水溶解，移入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度；
(2)．100μg/ml蔗糖标准液  精确吸取1%蔗糖标 ...

请问这个稀释倍数怎么算呢
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12楼2017-01-20 09:51:24
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milujite2010

铁虫 (小有名气)
目前主要做蔬菜这一块，根据经验稀释一般4-5倍就可以的吧，
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13楼2017-01-24 21:18:02
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Sherry914

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by nkylgx at 2014-05-13 16:16:47
我有测小麦的。不知道你需要不，过程应该一样

你好，我需要，麻烦您能发我一下吗
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有人爱，有事做，有所期待。
14楼2018-08-19 14:00:31
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nkylgx

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Sherry914 at 2018-08-19 14:00:31
你好，我需要，麻烦您能发我一下吗...

不好意思，我在桂林，等后天我回太原给你。

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15楼2018-08-20 20:49:03
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木木的小学生

新虫 (正式写手)
提取完上清液剩下的渣子烘干，然后再加乙醇提取，还要加啥我忘了，这样出来的才是淀粉

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16楼2018-08-21 15:52:22
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nkylgx

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
14楼: Originally posted by Sherry914 at 2018-08-19 14:00:31
你好，我需要，麻烦您能发我一下吗...

可溶性总糖的测定（蒽酮比色法）
摘要： 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在 620 nm 处有最大吸收 . 在 10 -100
一、目的?
? ? 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法.?
二、原理?
? ? 强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在 620 nm 处有最大吸收 . 在 10 -100ug 范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比.?
? ? 这一方法有很高的灵敏度,糖含量在 30ug 左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用.一般样品少的情况下,采用这一方法比较合适.?
三、仪器、试剂和材料?
1 、仪器?
（1）分光光度计?
（2）电子顶载天平?
（3）三角瓶： 50m1 X 1?
（4）大试管： 9 支?
（5）试管架,试管夹?
（6）漏斗,漏斗架?
（7）容量瓶： 50rnl X 2?
（8）刻度吸管： 1m1X3 ， 2m1X1 ， 5mlX1?
（9）水浴锅?
2、试剂?
（1）葡萄糖标准液： l00ug/ml?
（2）浓硫酸?
（3）蒽酮试剂 :0.2g 蒽酮溶于 100 ml 浓 H2SO4 中当日配制使用.
3、材料?
小麦分蘖节。?
四、操作步骤?
1 、葡萄糖标准曲线的制作?
取 7 支大试管,按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：?
管号? ? ? ? 1? ? ? ? 2? ? ? ? 3? ? ? ? 4? ? ? ? 5? ? ? ? 6? ? ? ? 7
葡萄糖标准液（ ml ）? ? ? ? 0? ? ? ? 0.1? ? ? ? 0.2? ? ? ? 0.3? ? ? ? 0.4? ? ? ? 0.6? ? ? ? 0.8
蒸馏水（ ml ） ? ? ? ? 1? ? ? ? 0.9? ? ? ? 0.8? ? ? ? 0.7? ? ? ? 0.6? ? ? ? 0.4? ? ? ? 0.2
葡萄糖含量（ ug ）? ? ? ? 0? ? ? ? 10? ? ? ? 20? ? ? ? 30? ? ? ? 40? ? ? ? 60? ? ? ? 80

? ? 在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4.0m1 ,迅速浸于冰水浴中冷却,各管加完后一起浸于沸水浴中,管口加盖玻璃球,以防蒸发.自水浴重新煮沸起,准确煮沸 l0min 取出,用流水冷却,室温放置 10min ,在 620 nm 波长下比色.以标准葡萄糖含量（ ug) 作横坐标,以吸光值作纵坐标,作出标准曲线.?
2 、植物样品中可溶性糖的提取?
? ? 将小麦分蘖节剪碎至 2mm 以下,准确称取 Ig, 放入 50m1 三角瓶中,加沸水 25m1 ,在水浴中加盖煮沸 10min ,冷却后过滤,滤液收集在 50m1 容量瓶中,定容至刻度.吸取提取液 2m1 ,置另一 50m1 容量瓶中,以蒸馏水稀释定容,摇匀测定.?
3、测定?
? ? 吸取 lml 已稀释的提取液于大试管中,加入 4.Oml 蒽酮试剂,以下操作同标准曲线制作.比色波长 620nm ,记录吸光度,在标准曲线上查出葡萄糖的含量（ ug ）.?
? ? 查表所得糖含量（ ug ）×稀释倍数?
五、结果处理?
六、注意事项?
1、该显色反应非常灵敏,溶液中切勿混入纸屑及尘埃.?
2、 H 2 SO 4 要用高纯度的.?
3、不同糖类与蒽酮的显色有差异,稳定性也不同.加热、比色时间应严格掌握.?

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17楼2018-08-22 17:21:13
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