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[求助]
请教有关Westen Blot抗体有关的问题
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最近在做蛋白质印迹,要买抗体,什么都不懂,急需各位大神的交流指导。 我们做的是从人细胞中提取出来的蛋白,现在主要存在两个问题: 1 哪家的抗体质量好、价格比较优惠,多数做蛋白的都选择的品牌 2 一抗有很多不同的种属来源,我应该选择同源的,比如我检测的是人细胞蛋白,就选人源的,或者异源的,比如我师兄买的就是兔源的,这个有什么选择标准吗? 本人现在已经研三了,急着做完蛋白这块要毕业了,跪求指导呀!!! |
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送红花一朵 |
谢谢,这个抗体的问题我基本上是搞明白了,还有些别的问题想请教您。 1你们做p65、p50,也是提的细胞核的蛋白吗?我每次提出来的蛋白浓度都很低,已经是按照2*105个/ml的密度铺板了,6个孔一组,提出来的蛋白浓度最多也就5μg/μl的样子。这还算好的,我做RAGE的时候,是提膜蛋白,那浓度甚至都只有1μg/μl,因为浓度太低都没法做后面的。想请教一下您那边是怎么做的,像这种能不能直接提总蛋白来做呢? 2我做了好几次,结果的背景很深,有时能看到条带但背景有些花,有时甚至看不到条带,一片都是黑的,转膜以前的操作应该都是没有问题的,封闭、洗膜这些我也都有注意,封闭用的脱脂奶粉2h,洗膜5min*5次,不知道是什么原因每次做出来的结果都不好,您能给指导一下不,嘿嘿?谢谢您了 |
15楼2013-10-17 09:00:04
cicelyzh
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3楼2013-09-27 08:41:23
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4楼2013-09-27 09:13:20













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