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DNA与配合物单晶培养问题 已有1人参与
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我用DNA与配合作用培养单晶，选取溶剂时有些疑问，求助各位大神： DNA和配合物单晶培养方法： 1. 取Cryschem plate,外围加入缓冲液A约1mL; (A该缓冲溶液为自己配制)； 2. 取Cryschem plate, 在中间空中加入配合物与DNA的混合溶液2uL（总浓度约为10uM,配合物浓度一般为8-12uM, DNA浓度一般为4uM, DNA与配合物的比例可以从1：1，1：2，1：3…）然后再往混合溶液中加入缓冲溶液B 2uL，（B缓冲溶液为购买的Nucleic Acid Mini Screen 24中不同缓冲溶液）. 3. 把plate用透明胶带封好(Crystal Clear Sealing Tape （HR3-511，1.88 inch wide Crystal Clear Sealing Tape)，然后盖上盖子，再在外面报上锡箔纸，避光。 问题是：缓冲液A一般是什么东西，作用为何，文献说自己配制，该怎么配置？ 缓冲液B买来就有24种，是直接使用呢还是要先处理？ 还有最后如何判断长出了单晶，有什么方便快速的检测方法？ 跪求 |
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2楼2013-09-26 09:10:36
3楼2013-09-26 11:07:27
4楼2013-09-27 08:04:18
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ynkuaile
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1. 缓冲液A一般是什么东西，作用为何，文献说自己配制，该怎么配置？ 溶解你的DNA与ligand用，如何配制，要求保证DNA与ligand稳定，参考别人文献。 2. 缓冲液B买来就有24种，是直接使用呢还是要先处理？ 直接使用 3. 还有最后如何判断长出了单晶，有什么方便快速的检测方法？ 显微镜下直接观察，体式显微镜。 你们组之前没人做过晶体，刚上来就做DNA复合物的晶体，感觉有点难。建议与其他课题组合作。 |
6楼2013-09-27 11:04:47
流晴
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