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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] 引物设计

我最近在做基因克隆的实验,设计了好几次引物都扩不出全长来,感觉快奔溃了,有没有哪位高手可以帮我设计对引物啊,可以的话我把基因序列发过去,拜托各位高手了。
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每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-09-22 21:19:07
楼主说酶含有内含子??你是想说你要扩的基因含有内含子吧?假如你要扩的序列是已知的,即有完整的CDS区,那么,引物很好设计,直接CDS区两端写应该都可以扩出来的,如果你的是未知的,那么你就要做RACE,如楼上有朋 ...

首先非常感谢,我有这个酶的完整的cDNA序列,我在这个CDNA序列的两端设计过引物,可是扩不出来,我也 不知道是什么原因,我想是不是因为我设计的引物有可能在以基因组为模板的时候被内含子隔断了呢?我的酶是植物中的一个酶。
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
11楼2013-09-23 10:58:56
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守望者047

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-09-20 19:57:27
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-09-22 14:29:51
扩未知序列全长需要做race,需要设计很多对引物。如果目的序列是已知全长序列的一部分,可以把全长序列(或者Genebank登录号)和目的序列的范围传上来。
数往者顺,知来者逆!
2楼2013-09-20 19:39:35
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-09-21 02:03:12
崔永霞: 金币+1, 有帮助 2013-09-25 20:34:25
求助-基因克隆及引物设计的问题
http://muchong.com/html/201203/4208171.html
3楼2013-09-20 19:58:52
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15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+25, ★★★很有帮助 2013-09-21 17:00:34
我看看
262358773@qq.com

发你的序列 和你设计的引物来  顺便简单介绍下啦
4楼2013-09-20 22:13:45
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