| 查看: 665 | 回复: 4 | ||
[求助]
易错PCR出现棕褐色沉淀 用怎样的Mn2+试剂可靠 浓度范围大概多少？
|
|
各位有经验的师兄师姐们： 最近在做易错PCR，准备先通过添加Mn2+来做一做，文献中控制的Mn2+浓度大概在0.1~0.5mmol/L，我这次做的条件如下。 模版50ng，dNTP 0.2mmol/L each，10*PCR buffer（Takara Mg2+plus）5ul，MnCl2（梯度：0、0.05、0.1、0.2、0.3mmol/L），Taq 2U。94℃ 5min，94℃ 40s，52℃ 1min，72℃ 2min 50s 循环30次，72℃ 18min，4℃。 结果时：未加Mn2+ 条带正确，其余的均没有条带。而且发现P完之后，PCR小管底部出现明显的棕褐色沉淀，此现象正常吗？？？这也太不靠谱了吧！ 此次用的MnCl2是自己利用实验室分析纯的MnCl2·4H2O（储液5mmol/L） 配的，是不是达不到PCR的纯度，是不是非得用公司的试剂盒。我觉得易错PCR应该没那么难成功吧感觉文献中都说的很简单啊，我还是想自己先试试，求各位指点迷津!!!!!!!!!!!!! |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有147人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2013-09-17 21:44:17
3楼2013-09-17 22:02:54
4楼2013-09-17 22:33:11
5楼2015-10-08 20:04:20
