应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 易错PCR出现棕褐色沉淀 用怎样的Mn2+试剂可靠 浓度范围大概多少？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 586  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

海尤希

新虫 (小有名气)

[求助] 易错PCR出现棕褐色沉淀 用怎样的Mn2+试剂可靠 浓度范围大概多少？

各位有经验的师兄师姐们：
         最近在做易错PCR，准备先通过添加Mn2+来做一做，文献中控制的Mn2+浓度大概在0.1~0.5mmol/L，我这次做的条件如下。
         模版50ng，dNTP 0.2mmol/L each，10*PCR buffer（Takara Mg2+plus）5ul，MnCl2（梯度：0、0.05、0.1、0.2、0.3mmol/L），Taq 2U。94℃  5min，94℃ 40s，52℃ 1min，72℃ 2min 50s 循环30次，72℃ 18min，4℃。
         结果时：未加Mn2+ 条带正确，其余的均没有条带。而且发现P完之后，PCR小管底部出现明显的棕褐色沉淀，此现象正常吗？？？这也太不靠谱了吧！
         此次用的MnCl2是自己利用实验室分析纯的MnCl2·4H2O（储液5mmol/L） 配的，是不是达不到PCR的纯度，是不是非得用公司的试剂盒。我觉得易错PCR应该没那么难成功吧感觉文献中都说的很简单啊，我还是想自己先试试，求各位指点迷津!!!!!!!!!!!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
冷静、加油。
1楼 2013-09-17 21:34:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海尤希

新虫 (小有名气)
补充一下！ 我配的MnCl2没有灭菌，就是用无菌水溶解后过了滤膜，大家快来帮忙啊！
赞一下 回复此楼
冷静、加油。
2楼2013-09-17 21:44:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海尤希

新虫 (小有名气)
各位师兄师姐，你们在哪里啊！！！！！！！
赞一下 回复此楼
冷静、加油。
3楼2013-09-17 22:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海尤希

新虫 (小有名气)
再补充一下，目的片段长约2000bp，是不是不适合用易错PCR啊，不懂，凌乱了！
赞一下 回复此楼
冷静、加油。
4楼2013-09-17 22:33:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seraphlx

新虫 (初入文坛)
我也出现褐色条带了，不知道为啥，我连滤膜也没用
赞一下 回复此楼
5楼2015-10-08 20:04:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海尤希 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +3 晚风不晚 2026-04-04 3/150 2026-04-04 09:30 by JourneyLucky
[考研] 283求调剂 +5 A child 2026-03-28 5/250 2026-04-04 00:40 by userper
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿郑州大学材料与化工085600，求调剂 +17 吃的不少 2026-04-02 17/850 2026-04-03 21:48 by qlm5820
[考研] 303求调剂 +10 DLkz1314. 2026-03-30 10/500 2026-04-03 18:03 by Jimmyandyou
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 专硕085601求调剂 +7 suyifei 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:00 by 欣喜777
[考研] 抱歉 +5 田洪有 2026-03-30 5/250 2026-04-03 10:24 by linyelide
[考研] 一志愿厦门大学材料工程专硕354找调剂！！！ +8 贝呗钡钡 2026-03-30 8/400 2026-04-03 09:41 by hypershenger
[考研] 277求调剂 +3 12A3 2026-04-02 3/150 2026-04-02 21:30 by swb0218
[考研] 一志愿华南师范大学-22408计算机-292分-求华南师范大学调剂 +4 爱读书的小鳄鱼 2026-04-02 4/200 2026-04-02 18:35 by 求调剂zz
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 9/450 2026-04-02 12:09 by ms629
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 284求调剂 +12 小熊～～ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 080200学硕，机械工程专业277分，求带走！ +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-29 3/150 2026-03-31 10:06 by cal0306
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +7 Shern—- 2026-03-28 7/350 2026-03-30 16:31 by nothing投稿中
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭