24小时热门版块排行榜    

查看: 851  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

Apollo919

新虫 (初入文坛)

[求助] 引物设计

CCTTCAAACACCAATCGCGAGCTGCCAAGCTAAAATACTTGTCAGCTCACGATGTAAAAATTTAGCGAAG
TTTTCACAATTTATGATTCTATTTCTCGCATTTACTGTTATAATATTTACTGTATCAATATATAGGAGGA
ATTTTTGTAATGAAAATTATTGCATATGCTGTACGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGA
AAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAA
AGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGAC
GAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCAC
GTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATT
GATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCA
GATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCA
TCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAA
GGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCT
GCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCT
TGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGC
CGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATT
GATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACA
CTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAA
AGCTGACACACAAGTTAAGTTTGATTAATCTCGATTATCACTGAAAATGGCGTCACTCATCTGAGTGACG
CCATTTTTTATGCTTTCACCTAAATGGGGCCTTTTCGAAGCGTTAACCCCAAGCGTACTTTCAATGCTGT
TATTATCCATAACAAAAAGCCCACAATAGAGCTGGTTGC
编码目标蛋白是从150-1145共996bp 332个氨基酸  想在5‘端加BamH I 在3’端加Hind III 求各路大侠设计下 不胜感激

[ Last edited by Apollo919 on 2013-9-16 at 21:20 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimingwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-17 14:44:25
D-lactate dehydrogenase
括号内是引物,阅读框自己矫正。
(GGATCC-ATGAAAATTATTGCATATGCTGTA)   CGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAAAGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGACGAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCACGTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATTGATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCAGATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCATCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAAGGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCTGCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCTTGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGCCGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATTGATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACACTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAA (AGCTGACACACAAGTTAAGTTTGAT-AAGCTT)
Let'sdoit.
3楼2013-09-16 22:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

Sthunder

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-17 14:44:15
怎么可能是150bp开始呢,应该是151bp吧,其次如果加BamHI的话你还要告知你的载体具体多克隆位点,否则很可能导致移码突变!
互助互励,共奋共进!!
2楼2013-09-16 22:22:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apollo919

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Sthunder at 2013-09-16 22:22:14
怎么可能是150bp开始呢,应该是151bp吧,其次如果加BamHI的话你还要告知你的载体具体多克隆位点,否则很可能导致移码突变!

ATGAAAATTATTGCATATGCTGTACGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAAAGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGACGAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCACGTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATTGATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCAGATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCATCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAAGGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCTGCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCTTGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGCCGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATTGATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACACTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAAAGCTGACACACAAGTTAAGTTTGAT
这是我要P的共996个bp的目的基因,希望能帮设计一对引物,谢谢
4楼2013-09-17 10:10:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Apollo919

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yimingwang at 2013-09-16 22:32:07
D-lactate dehydrogenase
括号内是引物,阅读框自己矫正。
(GGATCC-ATGAAAATTATTGCATATGCTGTA)   CGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTA ...

ATGAAAATTATTGCATATGCTGTACGTGATGACGAACGTCCATTCTTCGATACTTGGATGAAAGAAAACCCAGATGTTGAAGTTAAATTAGTTCCAGAATTACTTACTGAAGACAACGTTGACTTAGCTAAAGGCTTCGACGGTGCCGATGTATACCAACAAAAGGACTATACTGCTGAAGTATTGAACAAGTTAGCCGACGAAGGGGTTAAGAACATCTCTCTTCGTAACGTTGGTGTTGATAACTTGGACGTTCCTACTGTTAAAGCACGTGGCTTAAACATTTCTAACGTACCTGCATACTCACCAAATGCGATTGCTGAATTATCAGTAACGCAATTGATGCAATTATTACGTCAAACCCCATTGTTCAACAAGAAGTTAGCTAAGCAAGACTTCCGTTGGGCACCAGATATTGCCAAGGAATTAAACACCATGACTGTTGGTGTTATCGGTACTGGTCGGATTGGCCGTGCTGCCATCGATATTTTCAAAGGCTTCGGCGCTAAGGTTATCGGTTACGATGTTTACCGGAATGCTGAACTTGAAAAGGAAGGCATGTACGTTGACACCTTGGACGAATTATACGCCCAAGCTGATGTTATCACGTTACACGTTCCTGCATTGAAGGATAACTACCACATGTTGAATGCGGATGCCTTCAGCAAGATGAAAGATGGCGCCTACATCTTGAACTTTGCTCGTGGGACACTCATCGATTCAGAAGACTTGATCAAAGCCTTAGACAGTGGCAAAGTTGCCGGTGCCGCTCTTGATACGTATGAATACGAAACTAAGATCTTCAACAAAGACCTTGAAGGTCAAACGATTGATGACAAGGTCTTCATGAACTTGTTCAACCGCGACAATGTTTTGATTACACCACATACGGCTTTCTACACTGAAACTGCCGTTCACAACATGGTGCACGTTTCAATGAACAGTAACAAACAATTCATCGAAACTGGTAAAGCTGACACACAAGTTAAGTTTGAT
这是我要p的目的基因,你设计的上游引物咋和5‘端的一样呢?求解释
5楼2013-09-17 10:31:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:14 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:03 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 8/400 2026-08-30 12:02 by l0VvVHGBGRLv
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 11:51 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 06:10 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 13/650 2026-08-30 05:38 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:45 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
请填处理意见