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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 看图说话，请大家帮忙分析一下可能存在哪些问题
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 看图说话，请大家帮忙分析一下可能存在哪些问题 已有12人参与

问题如题

电泳条件：1%琼脂糖凝胶电流检测，80V、35mA、60min。
看图说话，请大家帮忙分析一下可能存在哪些问题
1.JPG
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
1楼 2013-09-13 09:26:26
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回帖置顶 ( 共有1个 )

adan1123

银虫 (小有名气)
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gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-09-20 00:20:43
gyesang: 回帖置顶 2013-09-20 00:20:50
引用回帖:
19楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-09-16 15:36:20
电压和电流在跑胶过程中都有什么作用呀？
电泳缓冲液我用的0.5×TBE，这个不行吗？...

制胶的时候随时看着液体的沸腾，不要放在微波炉里不管，加热一会就拿出来晃一下。跑胶靠的是电流，因为DNA分子是带电的。造成你这种情况的原因很多，不可能一一排除，尽量注意细节，很容易成功
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26楼2013-09-18 16:38:44
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居云

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-20 00:19:44
胶没有完全凝好，操之过急了。重新做一下就可以了
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18楼2013-09-15 20:34:44
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uchush

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
23楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-09-16 15:41:57
个人感觉M不够亮，其他的目的条带也不够亮...

呵呵，目的条带只有1500的话，1.0的胶没问题，其实还可以浓点，这可以让你的条带更sharp，另外60分钟时间有点长，也容易让条带变散，1500条带你完全可以用120伏恒压。还有建议就是缓冲液每次必用新的，我猜你貌似载体酶切，如果是的话一定加一个非酶切对照

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24楼2013-09-16 16:12:46
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adan1123

银虫 (小有名气)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-20 00:19:11
个人认为主要问题是电流太低了，80V至少要80mA吧。换个电泳槽或者电泳缓冲液试试
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2楼2013-09-13 11:09:47
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狼在身边

木虫 (小有名气)
★ ★
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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-20 00:19:18
个人认为是琼脂糖凝胶制备的问题，尤其是左边的Mark带，很明显。
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3楼2013-09-13 17:04:41
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liutong1026

铜虫 (小有名气)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-20 00:19:24
胶没有凝好
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4楼2013-09-14 10:13:08
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by adan1123 at 2013-09-13 11:09:47
个人认为主要问题是电流太低了，80V至少要80mA吧。换个电泳槽或者电泳缓冲液试试

电流低会影响什么呢？
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
5楼2013-09-14 16:10:03
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 狼在身边 at 2013-09-13 17:04:41
个人认为是琼脂糖凝胶制备的问题，尤其是左边的Mark带，很明显。

啥原因啊？琼脂糖浓度没问题吧
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
6楼2013-09-14 16:10:50
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liutong1026 at 2013-09-14 10:13:08
胶没有凝好

？？？？？真的？
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
7楼2013-09-14 16:11:48
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漂_浮

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按MARKER来看 应该是胶的问题吧  再重新制胶跑一下
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8楼2013-09-14 18:31:10
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 漂_浮 at 2013-09-14 18:31:10
按MARKER来看 应该是胶的问题吧  再重新制胶跑一下

意思是胶的浓度没有问题，但就是要重做一下胶，对吗
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
9楼2013-09-15 11:18:22
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小朱20131

新虫 (小有名气)
胶的问题。。。
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生命不息，奋斗不止.....
10楼2013-09-15 14:44:49
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