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LDH检测相关~
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南京建成的LDH试剂盒，检测细胞中LDH释放率 说明书提供了公式，一个是血清的一个是组织的，那么我想测细胞的需要用哪个呢？还是均用不上 |
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阿飞1990乖乖
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2楼2014-05-26 10:03:02
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乳酸脱氢酶(LDH)释放实验 （1） HK-2细胞以2x105/孔浓度接种于24孔板； （2） 实验前换无血清DMEM/F12培养液孵育24 h，使细胞同步于静止期； （3） 当HK-2细胞生长至65%～75%融合时，弃上清液，加入含不同浓度AA（ 0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml）的无血清DMEM/F12培养液0.5ml； （4） 孵育细胞48 h后，吸取培养上清入1.5ml Ep管中待测； （5） 用冷PBS液清洗细胞2～3次，将冷2%TritonX-100 0.5 ml加入各孔中，反复冻融吹打3次使细胞充分破裂溶解； （6） 吸取细胞裂解液入1.5ml Ep管中12000g（相当于12300ref）离心3min。取上清入另一1.5ml Ep管中。应用全自动生化分析仪检测该上清液LDH值（即细胞内的LDH值）和上述培养上清液中的LDH值； （7） 计算各组LDH释放率： LDH释放率(%)＝上清液LDH值x 100/（细胞内LDH值十上清液LDH值）。 我知道就这么多了，，如果你有更具体的麻烦你告知一下我 |
3楼2014-08-04 01:09:29
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乳酸脱氢酶(LDH)释放实验 （1） HK-2细胞以2x105/孔浓度接种于24孔板； （2） 实验前换无血清DMEM/F12培养液孵育24 h，使细胞同步于静止期； （3） 当HK-2细胞生长至65%～75%融合时，弃上清液，加入含不同浓度AA（ 0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml）的无血清DMEM/F12培养液0.5ml； （4） 孵育细胞48 h后，吸取培养上清入1.5ml Ep管中待测； （5） 用冷PBS液清洗细胞2～3次，将冷2%TritonX-100 0.5 ml加入各孔中，反复冻融吹打3次使细胞充分破裂溶解； （6） 吸取细胞裂解液入1.5ml Ep管中12000g（相当于12300ref）离心3min。取上清入另一1.5ml Ep管中。应用全自动生化分析仪检测该上清液LDH值（即细胞内的LDH值）和上述培养上清液中的LDH值； （7） 计算各组LDH释放率： LDH释放率(%)＝上清液LDH值x 100/（细胞内LDH值十上清液LDH值）。 我知道就这么多了，，如果你有更具体的麻烦你告知一下我 |
4楼2014-08-04 01:09:46
阿飞1990乖乖
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5楼2014-08-04 05:39:26
6楼2014-08-14 01:49:08