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秀丽线虫染细菌怎么办!!急
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周大熊
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虫号: 2503075
注册: 2013-06-09
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专业: 微生物生理与生物化学
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秀丽线虫染细菌怎么办!!急
怎么办,初次养!~~~~~~~
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1楼
2013-09-04 19:30:33
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hl16010921
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注册: 2013-06-20
性别: GG
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
xy656691: 金币+3, 感谢参与
2013-09-14 17:13:54
用氢氧化钾或氢氧化钠,次氯酸钠‘(或家用漂水)配成裂解液,把成虫裂解,把卵用M9洗干净,就OK了。裂解液配方线虫培养方法手册都有,文献也有。染菌不严重,可以用M9洗几次,然后放到干净NGM板上,几十分钟后挑到另一块干净NGM板上,倒个5次左右,就差不多了
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2楼
2013-09-12 09:25:32
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
一般先将虫子冲下来,离心,几百到几千转都行,弃m9.加裂解液裂解(时间要摸一下,时间长了会不孵化)。离心弃裂解液。加M9,轻轻混匀吹匀。离心。重复洗几次。离心转速我不记得了,不过以前高速低速都离过,10000转也有活的。(最后20度过夜,非必要步骤),放到干净的NGM板上,最好干一点的平板,体式显微镜最大倍数仔细观察,能看到L1期的虫子就OK了,看不到就放再两天,看有无大虫子。这也是线虫常用的同期化方法。
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4楼
2013-09-13 15:45:28
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