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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 多糖的纯化问题，求高手解答~~
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tq5005

银虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 我就是liuxu at 2013-09-05 15:12:22
直接观察颜色变化还是不太好吧 因为要是糖的含量小的话 貌似颜色和标准的查的不是很多 不是很容易看出来的吧 ~~嘿嘿

说的有道理，谢谢
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11楼2013-09-06 10:28:52
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重瓣栀子

木虫 (小有名气)
我做的时候都用苯酚硫酸显色后用酶标仪测吸光度，然后用吸光度来绘制洗脱曲线，再把峰的部位收集透析。曾经一根柱子上反复再生上样做了十次，每次的洗脱曲线都是差不多的。
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12楼2013-09-10 17:30:42
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shenyu0406

禁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
tq5005: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-09-12 14:37:02
本帖内容被屏蔽
13楼2013-09-12 14:17:53
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elsa2005

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sandy1233 at 2013-09-05 10:50:41
你纯化的目的是什么：1、纯化出多糖混合物的有效部位；2、分离得到单个含量在95%以上的多糖进行结构测定。
如果目的是1，则需要测多糖的含量，将含量较高的部分合并，以得到多糖含量较高的有效部位
如果目的是2， ...

你好，为了进行结构测定的话，至少需要提取多少公斤？我的样品粗多糖的得率是6%。还有薄层用的是硅胶层析还是纸层析还是别的什么的？
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14楼2014-10-16 17:17:10
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看你行不行

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 重瓣栀子 at 2013-09-10 17:30:42
我做的时候都用苯酚硫酸显色后用酶标仪测吸光度，然后用吸光度来绘制洗脱曲线，再把峰的部位收集透析。曾经一根柱子上反复再生上样做了十次，每次的洗脱曲线都是差不多的。

苯酚硫酸可以用酶标仪吗？不会腐蚀吗？一根柱子不卸下来反复再生能再生彻底吗，需要洗很多柱体积吗？
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坚挺的活着，相信美好的未来
15楼2015-03-10 15:09:27
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看你行不行

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by -Drake- at 2013-09-04 09:47:50
多糖的含量测定的确让人头疼，不稳定，要求每次操作条件基本一致，就连同一批不同瓶的硫酸对结果都有很大影响，但目前再也没什么更好的方法。
前面几瓶可以，后面收集到小容量瓶，还是得测

能不能问一下您的多糖含量是多少，我测的糖含量都特别低呢？
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坚挺的活着，相信美好的未来
16楼2015-03-10 15:23:23
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重瓣栀子

木虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 看你行不行 at 2015-03-10 15:09:27
苯酚硫酸可以用酶标仪吗？不会腐蚀吗？一根柱子不卸下来反复再生能再生彻底吗，需要洗很多柱体积吗？...

显色后把反应液吸到酶标板上再用酶标仪扫啊，就算是腐蚀也是腐蚀酶标板，我们这了省钱，一张板都是反复用，每次用完就用水加洗洁精超声清洗后再用，但每次用之前扫一下空白板再加样，如果空白板扫出来的吸光值已经很高了，这张板就完全报废了。
柱子不卸下来反复再生也能用，一般用酸、碱处理后柱子上的杂质都能洗掉，但是多次再生后柱子内的填料会越来越紧，洗脱曲线就会有一定差异了。如果你的填料多，可以一根柱子用完了倒出来再生，用新的填料再装柱，下一次再用再生好的填料装柱，如此反复。
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17楼2015-03-11 10:57:29
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