| 查看: 5629 | 回复: 12 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[交流]
重组质粒转染后绿色荧光表达的很奇怪，附图，求大神解释~~感激不尽
|
||||
|
重组质粒转染后绿色荧光表达的很奇怪， 和文献与别人做的差别很大， 我的荧光图都看不懂细胞形态，就是稀稀拉拉的云雾状，不知道是什么原因。 附图如下，求大神解释~~感激不尽 我用的载体是pEGFP-C2   20倍-8y-bl-木虫求助.jpg  40倍-10y-木虫求助.jpg  20倍-9p-木虫求助-明场.jpg  20倍-9y-木虫求助-明场对应.jpg  空载对照.JPG [ Last edited by sherrysure on 2013-9-5 at 14:52 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有100人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- GFP重组表达质粒电泳问题
已经有2人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
南京医科大学生殖医学与子代健康国重实验室-董飞宏课题组-学术硕士招生
+1/96
-
物理学 调剂
+1/84
-
有没有在香港的虫友啊
+1/80
-
河南工学院诚聘优秀凝聚态物理和电子科学与技术相关专业硕博研究生
+2/42
-
青岛大学泰山学者课题组招2026年申请考核制博士
+1/33
-
上海交通大学电催化方向博后招聘-有锂电、高分子、燃料电池背景者优先
+1/31
-
纺织科学与工程、材料化工方向招收研究生
+1/28
-
华南师范大学（211）申请审核制博士招生- 电子、自动化、机械、生物学、物理相关专业
+1/25
-
海南师范大学孙元元老师招生博士，名额1~2个，2026年9月份入学（光电/光热催化方向）
+1/18
-
学术/专业硕士调剂——化学、资源与环境
+1/15
-
福建师范大学化学与材料学院杜克钊团队博士/硕士招生
+1/14
-
山东省植物基蛋白技术创新中心课题组联合培养硕士研究生招募启事
+1/12
-
博士后招聘（高薪40万+）
+1/7
-
青岛科技大学可持续高分子团队 考研招生
+1/7
-
中国民航飞行学院先进连接团队招收航空宇航、航空机械专业硕士研究生（学硕专硕均可）
+1/7
-
211/双一流石河子大学化学化工学院-电催化，单原子催化，CO2转化
+1/7
-
哈尔滨理工大学材料与化学工程学院 纳米功能材料与光电催化团队 招收硕士研究生
+1/6
-
26年博士招生
+1/6
-
2026年上海大学王亮课题组招收电催化或光催化研究背景的博士生
+2/2
-
招收理论凝聚态物理/纳米光学/量子计算方向博士、硕士研究生/博士后
+1/1
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-06 13:16:37
sherrysure: 金币+5, 谢谢！ 2013-09-06 16:28:10
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-06 13:16:37
sherrysure: 金币+5, 谢谢！ 2013-09-06 16:28:10
| 1.文章里的图一般都是拍了几张甚至几十张里挑最佳视野的结果。而且一般都修过。你适当减低曝光时间，会更清晰些。2.转染过程对细胞膜是有损伤的，有时损伤很大。这导致细胞形态改变很正常。特别是瞬时转染24h后就观察的有时细胞还没恢复。细胞传个代要贴壁也得几个小时吧。所以转染遇到这情况很正常。如果表达几天内稳定，可以适当让细胞恢复一下（推测）3.膜蛋白的过表达可能影响细胞形态。毕竟膜表面的粘附可能会受到影响。4.空载体对照和你的基因的区别不明显。分不清细胞质和细胞膜表达。你把曝光时间调小，让光弱些，换40倍镜试试.调焦再细心些。照片荧光不要太亮了，导致周围都有些绿色了（空载体明显）。5.建议使用染料染细胞膜。这样能使结果更清晰准确。6.有条件的可以试试激光共聚焦显微镜，会清晰很多（调焦要耐心。）总之，转进去了，表达了，现在只是拍照和处理图片的问题，别太担心。很可能转入这个基因就是这样的。 |
10楼2013-09-05 15:25:08
2楼2013-09-04 03:04:51
3楼2013-09-04 08:42:41
4楼2013-09-04 09:59:32
