| 查看: 5507 | 回复: 12 | ||||
[交流]
重组质粒转染后绿色荧光表达的很奇怪，附图，求大神解释~~感激不尽
|
||||
|
重组质粒转染后绿色荧光表达的很奇怪， 和文献与别人做的差别很大， 我的荧光图都看不懂细胞形态，就是稀稀拉拉的云雾状，不知道是什么原因。 附图如下，求大神解释~~感激不尽 我用的载体是pEGFP-C2   20倍-8y-bl-木虫求助.jpg  40倍-10y-木虫求助.jpg  20倍-9p-木虫求助-明场.jpg  20倍-9y-木虫求助-明场对应.jpg  空载对照.JPG [ Last edited by sherrysure on 2013-9-5 at 14:52 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞生物学实验经验 |
» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有119人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- GFP重组表达质粒电泳问题
已经有2人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
东北大学-招收2026年硕士研究生2-3名（金属材料3D打印方向）
+5/135
-
中南林业科技大学-自然资源与生态环境管理-申请-考核制博士生招生（导师本人发布）
+1/81
-
大连理工大学智能系统实验室优秀硕博研究生招生
+1/80
-
深圳大学信息功能聚合物电介质方向“申请-考核制”博士生招生
+1/78
-
上海交通大学变革分子学中心申涛课题组2026秋季入学推荐-考核制博士招生（有机）
+1/77
-
中国地质大学（武汉）地质学、地质资源与地质工程、资源与环境方向招生，请尽快联系！
+1/68
-
中国科协青年托举（针对32岁青年人才的）是不是不搞了，25年都没有通知
+1/68
-
深圳大学信息功能聚合物电介质方向“申请-考核制”博士生招生
+2/36
-
华中科技大学周英教授招博后
+1/30
-
美国密苏里大学堪萨斯城分校（UMKC）生物材料诚聘全奖博士
+1/23
-
2026申博自荐 本硕双一流学科 纳米药物递送方向 一篇一区TOP 两个国家奖学金
+1/17
-
2026申博自荐 本硕双一流学科 纳米药物递送方向 一篇一区TOP 两个国家奖学金
+1/14
-
杨亚研究员课题组（广西大学-纳米能源研究中心）招收2026年物理学专业学术型博士
+1/7
-
2025版《中国药典》方法测定二甲基亚砜含量偏高
+1/5
-
中国计量大学叶德茂课题组招收博士研究生（欢迎计算机类、电子信息类等专业）
+1/4
-
南开大学齐迹课题组诚聘分子生物学、免疫学、有机分子合成相关方向的博士后和研究生
+1/4
-
中南民族大学-国家级领军人才团队超支化聚合物方向2026年博士研究生招生
+1/4
-
山东大学（青岛校区）招博士后（COF\MOF\催化\电池）
+1/2
-
山东师范大学海外优青（校长团队）招聘硕士/博士/博后
+1/2
-
深圳理工大学招聘AI4Science与分子模拟方向科研人员
+1/1
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-06 13:16:37
sherrysure: 金币+5, 谢谢！ 2013-09-06 16:28:10
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-09-06 13:16:37
sherrysure: 金币+5, 谢谢！ 2013-09-06 16:28:10
| 1.文章里的图一般都是拍了几张甚至几十张里挑最佳视野的结果。而且一般都修过。你适当减低曝光时间，会更清晰些。2.转染过程对细胞膜是有损伤的，有时损伤很大。这导致细胞形态改变很正常。特别是瞬时转染24h后就观察的有时细胞还没恢复。细胞传个代要贴壁也得几个小时吧。所以转染遇到这情况很正常。如果表达几天内稳定，可以适当让细胞恢复一下（推测）3.膜蛋白的过表达可能影响细胞形态。毕竟膜表面的粘附可能会受到影响。4.空载体对照和你的基因的区别不明显。分不清细胞质和细胞膜表达。你把曝光时间调小，让光弱些，换40倍镜试试.调焦再细心些。照片荧光不要太亮了，导致周围都有些绿色了（空载体明显）。5.建议使用染料染细胞膜。这样能使结果更清晰准确。6.有条件的可以试试激光共聚焦显微镜，会清晰很多（调焦要耐心。）总之，转进去了，表达了，现在只是拍照和处理图片的问题，别太担心。很可能转入这个基因就是这样的。 |
10楼2013-09-05 15:25:08
2楼2013-09-04 03:04:51
3楼2013-09-04 08:42:41
4楼2013-09-04 09:59:32
5楼2013-09-04 11:39:11
6楼2013-09-04 11:48:43
7楼2013-09-04 12:10:47
8楼2013-09-05 10:27:02
9楼2013-09-05 14:53:09
11楼2013-09-06 16:28:00
12楼2014-10-18 20:35:54
13楼2015-10-15 16:51:00