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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 乙醇使蛋白变性后可否复性？该如何让酶复性？
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雨伞

金虫 (小有名气)

[求助] 乙醇使蛋白变性后可否复性？该如何让酶复性？

请问大家乙醇使蛋白变性后可否复性？该如何让酶复性？我用的40%的乙醇。
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1楼 2013-08-30 11:55:16
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-30 18:04:57
雨伞: 金币+6, ★★★很有帮助 2013-09-04 00:23:16
乙醇沉淀可以作为蛋白析出的一种方法，注意要低温，搅拌要温和；
能不能复性也看你的蛋白的分子量，对于分子量较大有复杂构象的蛋白用乙醇沉淀往往会导致不可逆的变性，如果酶分子的分子量较小，去除乙醇后直接用预冷缓冲液溶解就可以让其复性
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2楼2013-08-30 14:26:32
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雨伞

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaopeiliang at 2013-08-30 14:26:32
乙醇沉淀可以作为蛋白析出的一种方法，注意要低温，搅拌要温和；
能不能复性也看你的蛋白的分子量，对于分子量较大有复杂构象的蛋白用乙醇沉淀往往会导致不可逆的变性，如果酶分子的分子量较小，去除乙醇后直接用预 ...

谢谢！请问含40%乙醇的蛋白质水溶液能做硫酸铵沉淀吗？该如何计算加入量与百分比之间关系。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-09-04 00:22:48
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xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-04 21:14:01
引用回帖:
3楼: Originally posted by 雨伞 at 2013-09-04 00:22:48
谢谢！请问含40%乙醇的蛋白质水溶液能做硫酸铵沉淀吗？该如何计算加入量与百分比之间关系。
...

理论上没有什么障碍，但是如果加硫酸铵饱和溶液会导致乙醇的百分比变化，两种方法我们也没有同时用过，只能楼主努力了
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4楼2013-09-04 10:40:55
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