24小时热门版块排行榜    

查看: 1887  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

oylb

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ZXWAN

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好,我最近也在做EMSA,也用的这个试剂盒,和你加样的方式也一样,第一个孔只加探针,第二加目的基因和探针、第三个加目的基因、探针及竞争探针,但是我每次跑出来的带3个点样孔里的都一样,且都有3条带,这三条带中最大的那条和试剂盒里提供的阳性对照的探针带大小一样。不知道什么原因?你有遇到过这些问题吗?还有你认为什么什么原因?谢谢!
5楼2013-09-02 15:42:31
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
oylb(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 09:25:49
oylb: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-30 09:48:16
图一探针没有跑好. 第一条跑道理论上没有蛋白, 所以无法从图一做EMSA的结论.
图二可以下结论, 楼主希望检测的shift还没有做出来, 因为加了竞争DNA的第三条跑到和第二条没有区别. 请问楼主加的竞争DNA的量有没有达到探针的100倍? 如果有甚至更高(这样竞争DNA绝对加足够了), 楼主就需要摸索蛋白和探针结合的条件, 调buffer, 调蛋白浓度..各种调.
2楼2013-08-30 04:37:04
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
oylb(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 09:26:02
楼主所有的样品都停在加样孔了,根本没有在胶上跑
理论上你的DNA应该是带负电荷, 因此应该能在胶上移动
怀疑是缓冲液的问题,你DNA用的缓冲液和阳性对照用的缓冲液一样吗?确认pH也一样吗?
最好能把跑胶的条件,包括电解缓冲液和你溶解DNA用的缓冲液的组分都列出来
目前先不要管蛋白的,先要让你的DNA能走出加样孔再说
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2013-08-30 07:06:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oylb

禁言 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

4楼2013-08-30 09:47:40
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 346求调剂[0856] +4 WayneLim327 2026-03-16 7/350 2026-03-21 04:02 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 280求调剂 +7 咕噜晓晓 2026-03-18 8/400 2026-03-21 01:27 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 319求调剂 +3 小力气珂珂 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:47 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
请填处理意见