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汕头大学海洋科学接受调剂
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oylb

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生物学

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dcb005

金虫 (著名写手)

送红花一朵
我和你遇到一模一样情况,我染色看那个可能是蛋白滞留点样孔,请问你解决了么?换的buffer?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
★穷则独善其身,达则兼济天下★
8楼2014-11-21 08:35:27
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
oylb(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 09:25:49
oylb: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-30 09:48:16
图一探针没有跑好. 第一条跑道理论上没有蛋白, 所以无法从图一做EMSA的结论.
图二可以下结论, 楼主希望检测的shift还没有做出来, 因为加了竞争DNA的第三条跑到和第二条没有区别. 请问楼主加的竞争DNA的量有没有达到探针的100倍? 如果有甚至更高(这样竞争DNA绝对加足够了), 楼主就需要摸索蛋白和探针结合的条件, 调buffer, 调蛋白浓度..各种调.
2楼2013-08-30 04:37:04
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
oylb(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-08-30 09:26:02
楼主所有的样品都停在加样孔了,根本没有在胶上跑
理论上你的DNA应该是带负电荷, 因此应该能在胶上移动
怀疑是缓冲液的问题,你DNA用的缓冲液和阳性对照用的缓冲液一样吗?确认pH也一样吗?
最好能把跑胶的条件,包括电解缓冲液和你溶解DNA用的缓冲液的组分都列出来
目前先不要管蛋白的,先要让你的DNA能走出加样孔再说
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2013-08-30 07:06:02
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oylb

禁言 (正式写手)

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4楼2013-08-30 09:47:40
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