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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 琼脂糖凝胶电泳EB染色，紫外照相图为啥上半部分胶是亮的，下半部分是暗的？
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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳EB染色，紫外照相图为啥上半部分胶是亮的，下半部分是暗的？

琼脂糖试过西班牙产的（BIOWEST），也试过TransGen的，跑完胶都是出现一半亮，一半暗，加EB后也摇匀了，请问这是为什么呢？
琼脂糖凝胶电泳EB染色，紫外照相图为啥上半部分胶是亮的，下半部分是暗的？
IMG_5787.JPG
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1楼 2013-08-28 20:37:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

davidoy

新虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 13:27:47
gyesang: 回帖置顶 2013-08-29 13:27:52
EB带正电，电泳时在电场作用下向正极移动，上部明亮部分为带有EB的胶，继续跑胶的话，分界点会上移，直至完全跑出。之所以会出现这种现象，是因为EB均匀分布在胶中，而胶有长度。
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4楼2013-08-28 23:34:15
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普通回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
愤怒的小笨鸟: 金币+1, ★有帮助 2013-08-29 10:26:05
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 13:27:34
我觉得这个胶跑得挺好的了   不用纠结，可能是拍照系统灯的问题或者曝光的问题，不影响分析就行
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兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
2楼2013-08-28 20:55:39
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33ggdf

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
愤怒的小笨鸟: 金币+1, ★有帮助 2013-08-29 10:26:47
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 13:27:41
楼主要求蛮高的 这张图已经不错啦 之所以会出现你说的那个原因 不是你胶的问题 是凝胶成像的问题 不过这都是小问题啦
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3楼2013-08-28 22:55:28
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 改善的方法 2013-08-29 13:28:04
你胶里加了EB,跑胶的缓冲液里没加EB
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2013-08-29 08:30:52
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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-08-29 08:30:52
你胶里加了EB,跑胶的缓冲液里没加EB

电泳缓冲液中也要加EB？你试过吗？
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6楼2013-08-29 10:27:37
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2013-08-29 13:28:14
愤怒的小笨鸟: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-09-06 08:35:32
引用回帖:
6楼: Originally posted by 愤怒的小笨鸟 at 2013-08-29 10:27:37
电泳缓冲液中也要加EB？你试过吗？...

电泳缓冲液加不加都试过
如果保证缓冲液里EB浓度和胶里EB浓度一样就不会一半黑一半白了,不过一半黑一半白也不碍事
还可以胶里和电泳缓冲液都不加EB,然后最后把胶泡在含EB的缓冲液里染色,效果不太好,不过也能看到条带
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2013-08-29 10:54:05
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-29 13:28:19
愤怒的小笨鸟: 金币+1 2013-09-06 08:34:34
这个现象挺常见的，因为不影响看图所以我也没去深究，听过有人说是因为跑胶的时候EB也在迁移，下面黑的部分是因为EB跑到胶外面了，不确定是不是这原因。
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8楼2013-08-29 11:04:02
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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愤怒的小笨鸟: 金币+1, ★有帮助 2013-08-29 20:27:42
EB加地入胶里跑的，跑完胶用EB水泡染就好了
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生命不息，探索不止。
9楼2013-08-29 17:11:06
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶太干了 你把胶用水冲一下 再拍照
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想你没话说
10楼2013-08-30 08:35:52
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