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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳EB染色,紫外照相图为啥上半部分胶是亮的,下半部分是暗的?

琼脂糖试过西班牙产的(BIOWEST),也试过TransGen的,跑完胶都是出现一半亮,一半暗,加EB后也摇匀了,请问这是为什么呢?
琼脂糖凝胶电泳EB染色,紫外照相图为啥上半部分胶是亮的,下半部分是暗的?
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davidoy

新虫 (初入文坛)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 13:27:47
gyesang: 回帖置顶 2013-08-29 13:27:52
EB带正电,电泳时在电场作用下向正极移动,上部明亮部分为带有EB的胶,继续跑胶的话,分界点会上移,直至完全跑出。之所以会出现这种现象,是因为EB均匀分布在胶中,而胶有长度。
4楼2013-08-28 23:34:15
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普通回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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愤怒的小笨鸟: 金币+1, 有帮助 2013-08-29 10:26:05
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 13:27:34
我觉得这个胶跑得挺好的了   不用纠结,可能是拍照系统灯的问题或者曝光的问题,不影响分析就行
兴趣是第一导师,我爱它,因此我毫无疲倦的探索
2楼2013-08-28 20:55:39
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33ggdf

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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愤怒的小笨鸟: 金币+1, 有帮助 2013-08-29 10:26:47
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 13:27:41
楼主要求蛮高的 这张图已经不错啦 之所以会出现你说的那个原因 不是你胶的问题 是凝胶成像的问题 不过这都是小问题啦
3楼2013-08-28 22:55:28
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

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★ ★
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gyesang: 金币+2, 改善的方法 2013-08-29 13:28:04
你胶里加了EB,跑胶的缓冲液里没加EB
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
5楼2013-08-29 08:30:52
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愤怒的小笨鸟

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2013-08-29 08:30:52
你胶里加了EB,跑胶的缓冲液里没加EB

电泳缓冲液中也要加EB?你试过吗?
6楼2013-08-29 10:27:37
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2013-08-29 13:28:14
愤怒的小笨鸟: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-09-06 08:35:32
引用回帖:
6楼: Originally posted by 愤怒的小笨鸟 at 2013-08-29 10:27:37
电泳缓冲液中也要加EB?你试过吗?...

电泳缓冲液加不加都试过
如果保证缓冲液里EB浓度和胶里EB浓度一样就不会一半黑一半白了,不过一半黑一半白也不碍事
还可以胶里和电泳缓冲液都不加EB,然后最后把胶泡在含EB的缓冲液里染色,效果不太好,不过也能看到条带
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
7楼2013-08-29 10:54:05
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wangweida2

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-29 13:28:19
愤怒的小笨鸟: 金币+1 2013-09-06 08:34:34
这个现象挺常见的,因为不影响看图所以我也没去深究,听过有人说是因为跑胶的时候EB也在迁移,下面黑的部分是因为EB跑到胶外面了,不确定是不是这原因。
8楼2013-08-29 11:04:02
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)

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愤怒的小笨鸟: 金币+1, 有帮助 2013-08-29 20:27:42
EB加地入胶里跑的,跑完胶用EB水泡染就好了
生命不息,探索不止。
9楼2013-08-29 17:11:06
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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胶太干了 你把胶用水冲一下 再拍照
想你没话说
10楼2013-08-30 08:35:52
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