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pankun

银虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱分离多肽保留时间太短

最近在做多肽分离,流速为1ml/min时,出峰时间为2.5min,流速为0.5ml/min时,出峰时间为5min,而且就只有一个峰,有拖尾现象。我用的是 C18柱,流动相为水和乙腈,梯度洗脱,15min内乙腈浓度为0-80%。请各位前辈帮忙分析分析,谢谢!
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pankun: 金币+4 2013-08-28 16:38:22
加离子对试剂或者换极性大的色谱柱吧
悲催的研发!
5楼2013-08-27 16:36:11
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 辛苦了,感谢交流,欢迎常来分析版~ 2013-10-09 14:06:42
有条件的话,换个柱子试试。其他品牌的,或者更长的柱子。
水和乙腈里,可以各加0.1%的TFA.
你的C18能用纯水吗?
可以的话,先用水冲5分钟,再走梯度。
2楼2013-08-27 10:59:14
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pankun

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2013-08-27 10:59:14
有条件的话,换个柱子试试。其他品牌的,或者更长的柱子。
水和乙腈里,可以各加0.1%的TFA.
你的C18能用纯水吗?
可以的话,先用水冲5分钟,再走梯度。

我的柱子是岛津的ODS C18柱。 老师说不能用纯水对柱子不好。我加酸了,但是会出现倒峰。0.05%的TFA 就很酸了,我测了一下pH2.4. 这么低的pH 行么?
3楼2013-08-27 11:19:19
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
pankun: 金币+6 2013-08-28 16:38:10
pH2.4应该没问题
看柱子的说明书,有pH的使用范围的。
倒峰不用管,没关系。
不用纯水的话,就2%的乙腈或者5%的乙腈
4楼2013-08-27 13:12:16
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