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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱分离多肽保留时间太短
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pankun

银虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱分离多肽保留时间太短

最近在做多肽分离，流速为1ml/min时，出峰时间为2.5min，流速为0.5ml/min时，出峰时间为5min，而且就只有一个峰，有拖尾现象。我用的是 C18柱，流动相为水和乙腈，梯度洗脱，15min内乙腈浓度为0-80%。请各位前辈帮忙分析分析，谢谢！
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1楼 2013-08-27 10:13:19
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 辛苦了，感谢交流，欢迎常来分析版~ 2013-10-09 14:06:42
有条件的话，换个柱子试试。其他品牌的，或者更长的柱子。
水和乙腈里，可以各加0.1%的TFA.
你的C18能用纯水吗？
可以的话，先用水冲5分钟，再走梯度。
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2楼2013-08-27 10:59:14
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pankun

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cpuclz at 2013-08-27 10:59:14
有条件的话，换个柱子试试。其他品牌的，或者更长的柱子。
水和乙腈里，可以各加0.1%的TFA.
你的C18能用纯水吗？
可以的话，先用水冲5分钟，再走梯度。

我的柱子是岛津的ODS C18柱。 老师说不能用纯水对柱子不好。我加酸了，但是会出现倒峰。0.05%的TFA 就很酸了，我测了一下pH2.4. 这么低的pH 行么？
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3楼2013-08-27 11:19:19
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cpuclz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
pankun: 金币+6 2013-08-28 16:38:10
pH2.4应该没问题
看柱子的说明书，有pH的使用范围的。
倒峰不用管，没关系。
不用纯水的话，就2%的乙腈或者5%的乙腈
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4楼2013-08-27 13:12:16
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pankun: 金币+4 2013-08-28 16:38:22
加离子对试剂或者换极性大的色谱柱吧
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悲催的研发！
5楼2013-08-27 16:36:11
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mingge

银虫 (正式写手)
同意2楼的 ，可以将梯度拉长一点，这样就可以将保留时间往后推。
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Q1454596160
6楼2013-10-09 13:04:44
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