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pankun

银虫 (初入文坛)

[交流] 液相色谱分离多肽保留时间太短 已有4人参与

请问各位前辈:反相液相色谱分离多肽保留时间太短,2min 就出峰了,请问要怎么改进? 我用的流动相是水和乙腈,柱子:VP-ODS C18柱。 谢谢!
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自由的柚柚

金虫 (正式写手)

那是溶剂峰吧

[ 发自小木虫客户端 ]
热情地工作,快乐地生活
2楼2013-08-27 01:52:52
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gky01

至尊木虫 (著名写手)


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估计是溶剂峰,不过可以用质谱确认一下,如是样品峰,可选择等度洗脱啊。
steven
3楼2013-08-27 08:39:55
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pankun

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gky01 at 2013-08-27 08:39:55
估计是溶剂峰,不过可以用质谱确认一下,如是样品峰,可选择等度洗脱啊。

应该是样品峰,因为后面一直没峰呀,我用梯度洗脱了,乙腈0-80%,时间20min。流速0.5-1ml/min 都试过。请问乙腈的浓度对保留时间有什么影响?
4楼2013-08-27 09:33:48
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gky01

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
与你物质的极性有关,你可以把乙腈的梯度重设一下,如50-80%之类的,在0.5ml/min的流速条件试一下。我也碰到过2分钟出峰的,如果对你的结果不产生影响,那也可以啊。
steven
5楼2013-08-27 12:39:42
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天涯水之皮

新虫 (小有名气)


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减小流速,或者降低有机相比例试试。
6楼2013-08-28 11:02:40
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kaka1045

铜虫 (小有名气)


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降低流动相浓度,或者换极性低的流动相,再有就是减小流速
7楼2013-09-04 10:10:11
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