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whyxmc

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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帖子: 23
在线: 29.3小时
虫号: 1529075
注册: 2011-12-08
专业: 药剂学

[求助] 求助--肝微粒体孵育实验

各位虫友，大家好，我最近在做肝微粒体孵育实验但是没有反应，
我的反应体系是：肝微粒体 + 药 + NADPH + Mgcl2 + 缓冲液 → 共1ml ，
先将肝微粒体 + 药 + Mgcl2 + 缓冲液37℃预孵育5min，NADPH 37℃预孵育5min 然后加到一块，于5、10、20、30、60、90、120min取100ul加100ul冰冷的甲醇溶液并放入-20℃冰箱中终止反应。
肝微粒体是直接买的，终浓度为1mg/ml。 NADPH四钠盐买的是罗氏的，用水配后分装小瓶，-80度冷冻，随用随拿，反应终浓度1mmol /L 。药物先取了个中间值试试，是600 umol/L，还有一个终浓度5mmol/L的Mgcl2。肝微粒体和NADPH应该都没有什么问题啊但是却没什么反应这是怎么回事呢难道不该用NADPH或者是用水配不行？还是很说我的浓度有问题呢，我的缓冲液是ph7.4的磷酸钾缓冲液，望各位虫友不吝赐教！金币奉送！

[ Last edited by 1949stone on 2013-8-27 at 07:55 ]

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