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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落PCr
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dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCr

最近做连接时，菌落PCR的条带很浅，下面还有明显的引物二聚体，请问这是连上了还是没连上啊？菌落PCR条带会因为引物二聚体而导致目的条带浅吗？
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1楼 2013-08-23 20:55:42
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lianfeng1107

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dewdan(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-26 18:41:17
如1楼所说，只要在你的片段大小相应的位置有条带就初步可以说是转入成功了，如果加上对照那就更可以说明问题了。可以送去测序进一步证明是否成功。只要能P出片段，引物二聚体也无妨。
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9楼2013-08-26 10:29:39
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-24 02:06:56
菌落PCR检测只要有条带，就说明连接成功了，跟条带深浅没关系，与引物二聚体也没关系
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自主创业者，捣腾生物试剂
2楼2013-08-23 20:59:49
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fantasist001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-24 02:07:09
如楼上所述，连上的可能性很大。
建议每次做都加上正负对照，确保剔假阳性。有时候非特异扩增也会的到相似大小的条带，虽然几率非常低。
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3楼2013-08-23 21:31:03
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-24 02:07:17
带上阳性对照和阴性对照啊
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4楼2013-08-23 21:38:37
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