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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菌落PCr
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dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCr

最近做连接时，菌落PCR的条带很浅，下面还有明显的引物二聚体，请问这是连上了还是没连上啊？菌落PCR条带会因为引物二聚体而导致目的条带浅吗？
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1楼 2013-08-23 20:55:42
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chenhuan987

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-26 10:10:54
既然有条带，就是连上了，就是可能量比较少，再过培养一段时间就可以。引物二聚体经常会有，多多少少会影响实验结果，毕竟你的引物只有那么多，都成引物二聚体了，那个真正参与扩增的就少了
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7楼2013-08-25 17:32:59
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2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-24 02:06:56
菌落PCR检测只要有条带，就说明连接成功了，跟条带深浅没关系，与引物二聚体也没关系
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自主创业者，捣腾生物试剂
2楼2013-08-23 20:59:49
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fantasist001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-08-24 02:07:09
如楼上所述，连上的可能性很大。
建议每次做都加上正负对照，确保剔假阳性。有时候非特异扩增也会的到相似大小的条带，虽然几率非常低。
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3楼2013-08-23 21:31:03
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-08-24 02:07:17
带上阳性对照和阴性对照啊
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4楼2013-08-23 21:38:37
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