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dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCr

最近做连接时,菌落PCR的条带很浅,下面还有明显的引物二聚体,请问这是连上了还是没连上啊?菌落PCR条带会因为引物二聚体而导致目的条带浅吗?
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chenhuan987

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-26 10:10:54
既然有条带,就是连上了,就是可能量比较少,再过培养一段时间就可以。引物二聚体经常会有,多多少少会影响实验结果,毕竟你的引物只有那么多,都成引物二聚体了,那个真正参与扩增的就少了
7楼2013-08-25 17:32:59
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查看全部 11 个回答

2008101111

金虫 (正式写手)

学术江湖混子

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-24 02:06:56
菌落PCR检测只要有条带,就说明连接成功了,跟条带深浅没关系,与引物二聚体也没关系
自主创业者,捣腾生物试剂
2楼2013-08-23 20:59:49
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fantasist001

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-08-24 02:07:09
如楼上所述,连上的可能性很大。
建议每次做都加上正负对照,确保剔假阳性。有时候非特异扩增也会的到相似大小的条带,虽然几率非常低。
3楼2013-08-23 21:31:03
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


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gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2013-08-24 02:07:17
带上阳性对照和阴性对照啊
4楼2013-08-23 21:38:37
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