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tinyys

银虫 (小有名气)

[求助] 荧光定量PCR出现HighSD的原因及解决办法,求大侠帮帮忙

如题,出现high standard deviation in replicate 。
我做标准曲线,有一个重复的三个管出现此问题。请问是因为梯度没稀释好还是引物的浓度问题?
梯度稀释我一般都吹打100次左右。引物是F和R混合在一起加。
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成长总是伴随一些无奈的
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ivyvampire

新虫 (正式写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-22 16:53:46
CT值高不,如果接近循环数尾声,那就是值不准了,达不到梯度下限值,需提高模板浓度。(我们引物浓度和体系一般定量了的)
另外尽可能都配成MIX,加样仔细点,一般都没问题的
2楼2013-08-22 13:47:52
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