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mpc811223

金虫 (小有名气)

[求助] 色谱问题咨询

一个多肽样品色谱上显示为双峰，但采用水溶解放置一段时间后，又变为单峰。什么原因？有相关文献吗？
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1楼 2013-08-20 14:00:17
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2013-08-20 15:29:57
是否为水解？部分多肽在溶解于水中时，会有水解。因此造成你出现单峰。你可以看一下单峰面积和双峰面积是否一致，原有多肽样品中杂质含量情况，水溶解后样品中杂质含量和种类是否有改变。前后对比一下。
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2楼2013-08-20 14:49:24
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hanxizhen

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
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河边的芦苇: 金币+1, 感谢回帖交流 2013-08-20 15:30:34
考虑元物质是否在水中水解了，并且计算单峰后的峰面积有没有增加，或者在紫外下全扫，查看水解的物质是否变成了另外一个物质。
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加油
3楼2013-08-20 15:05:01
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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多肽序列中是否含有如Trp或者Ser-ser  ，Thr-Ser 等类似的残基或者是 片段。
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4楼2013-08-20 15:42:14
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先弄清你的样品在水中是否稳定，如果本身不稳定，那么出双峰表明已有降解；你可以做个对比试验，用有机溶剂溶解你的同个样品，同样操作，看是否会出现类似情况？
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gwmgyp
5楼2013-08-20 17:15:29
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kaifengbit

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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我认为从两个方面考虑：

1、从色谱分离看，两峰的分离度是大于1.5吗？如果起初两峰并未完全分离的话，是否后续有可能成单峰呢？以及进样量是否有变化呢？
2、从样品的稳定性考虑，如果样品不稳定的话，很可能出现这种情况；
3、还有单峰的位置是否为双峰的某一峰重叠呢，还是在新位置出峰？
4、所以对比保留时间，峰面积、紫外吸收曲线的变化，做出合理的分析
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6楼2013-08-20 17:45:10
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

应该序列中trp吧，放置一段时间后二氧化碳会跑掉，就成单峰了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2013-08-25 06:23:03
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