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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酵母菌培养
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
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5楼: Originally posted by 大鱼小心 at 2013-08-23 10:02:34
何为培养不出来，是什么都不长，还是长的都不是？

在最初的24h内什么都不长，之后偶尔长出几个，经过镜检，不是酵母菌
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11楼2013-09-13 10:22:50
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 破网 at 2013-08-23 12:10:11
先使用液体培养，就是普通的YPD培养基或者是麦芽汁培养基，摇床培养，培养时间，24小时长了的话就可以涂布或者斜面，如果没长，时间可以延长到48小时或者72小时。如果还是不长，那基本就是挂了。

菌剂中什么微生物都有，在YPD或PDA培养中，我想抑制细菌的生长，加入氨苄青霉素（100mg/ml），结果在最初的24h内什么都不长，之后偶尔长出几个，经过镜检，不是酵母菌；之后换了同样浓度的氯霉素，结果依然如此，怎么回事？
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12楼2013-09-13 10:24:12
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 破网 at 2013-09-13 10:22:50
你确定你有酵母？...

确定有
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13楼2013-09-13 10:25:36
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 破网 at 2013-09-13 10:22:50
你确定你有酵母？...

经过镜检，确定有酵母
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14楼2013-09-13 10:27:43
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


laozuzunzhe: MicEPI+1, good! 2013-09-16 10:35:38
依你描述和回帖的情况，个人认为，主要原因是你的菌剂中含有的酵母菌不是优势菌；另外活性也不够。个人建议如下操作：

1. 富集培养：利用富营养培养基如LB，牛肉膏，蛋白胨等。

2. 传代培养，保证活性：仍采用富营养培养基，分出5个平行，传代2~3次。

3. 优势菌株初筛：继续传代培养，逐渐增加氨苄抗性浓度，氨苄对真菌无效。

4. 酵母菌复筛：利用YPD，MD（需补足必要成分）等培养基进行复筛，扩大培养。

5. 平板涂布培养，逐级稀释，获得单菌落。

6. 划线分离，得到纯化的酵母野生菌。

个人见解，仅供参考。
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云中鸿雁
15楼2013-09-13 12:16:13
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by reallpf at 2013-09-13 12:16:13
依你描述和回帖的情况，个人认为，主要原因是你的菌剂中含有的酵母菌不是优势菌；另外活性也不够。个人建议如下操作：

1. 富集培养：利用富营养培养基如LB，牛肉膏，蛋白胨等。

2. 传代培养，保证活性：仍采用 ...

太谢谢啊，我按照你的方法试试吧！
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16楼2013-09-14 10:40:51
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