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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by 大鱼小心 at 2013-08-23 10:02:34
何为培养不出来,是什么都不长,还是长的都不是?

在最初的24h内什么都不长,之后偶尔长出几个,经过镜检,不是酵母菌
11楼2013-09-13 10:22:50
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 破网 at 2013-08-23 12:10:11
先使用液体培养,就是普通的YPD培养基或者是麦芽汁培养基,摇床培养,培养时间,24小时长了的话就可以涂布或者斜面,如果没长,时间可以延长到48小时或者72小时。如果还是不长,那基本就是挂了。

菌剂中什么微生物都有,在YPD或PDA培养中,我想抑制细菌的生长,加入氨苄青霉素(100mg/ml),结果在最初的24h内什么都不长,之后偶尔长出几个,经过镜检,不是酵母菌;之后换了同样浓度的氯霉素,结果依然如此,怎么回事?
12楼2013-09-13 10:24:12
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 破网 at 2013-09-13 10:22:50
你确定你有酵母?...

确定有
13楼2013-09-13 10:25:36
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 破网 at 2013-09-13 10:22:50
你确定你有酵母?...

经过镜检,确定有酵母
14楼2013-09-13 10:27:43
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


laozuzunzhe: MicEPI+1, good! 2013-09-16 10:35:38
依你描述和回帖的情况,个人认为,主要原因是你的菌剂中含有的酵母菌不是优势菌;另外活性也不够。个人建议如下操作:

1. 富集培养:利用富营养培养基如LB,牛肉膏,蛋白胨等。

2. 传代培养,保证活性:仍采用富营养培养基,分出5个平行,传代2~3次。

3. 优势菌株初筛:继续传代培养,逐渐增加氨苄抗性浓度,氨苄对真菌无效。

4. 酵母菌复筛:利用YPD,MD(需补足必要成分)等培养基进行复筛,扩大培养。

5. 平板涂布培养,逐级稀释,获得单菌落。

6. 划线分离,得到纯化的酵母野生菌。

个人见解,仅供参考。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

15楼2013-09-13 12:16:13
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云中鸿雁

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
15楼: Originally posted by reallpf at 2013-09-13 12:16:13
依你描述和回帖的情况,个人认为,主要原因是你的菌剂中含有的酵母菌不是优势菌;另外活性也不够。个人建议如下操作:

1. 富集培养:利用富营养培养基如LB,牛肉膏,蛋白胨等。

2. 传代培养,保证活性:仍采用 ...

太谢谢啊,我按照你的方法试试吧!
16楼2013-09-14 10:40:51
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