24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4915  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

键盘上的脚丫

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导

Sample Text

我做的是马氏珠母贝的外套膜和边缘膜的RNA的提取

操作步骤是这样的:
1、样品早上10点从贝中提取出来,接着在液氮中冻存并保存了4个小时
2、下午2点做,用于depc处理过的2微升管取样并加入tirzol  1ml,加入小钢珠,用匀浆器匀浆8分钟
3、用镊子取出小钢珠,放置5min
4、加入氯仿200微升,涡旋30s
4、12000r,4℃,15min
5、吸取上清400微升于depc处理过的1.5ml离心管中,异丙醇400微升
6、室温放置10min
7、12000r,4℃,10min
8、弃去上清,加入1ml 的75%depc配置的乙醇,剧烈震荡
9、12000r,4℃,5min
10、在垂直层流操作台晾干10min,加入20微升的depc水溶解(没有pcr ,也没有测过其浓度,师姐说不用,测没意义)。
11、琼脂糖凝胶电泳 ,其余样品-80℃保存。
12、琼脂糖凝胶的配置:
        凝胶浓度:1%   
       电压:120V
       电流:60MA
       跑的时间:30min
缓冲液:0.5xTBE
琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导
RNA电泳图.PNG

[ Last edited by 键盘上的脚丫 on 2013-8-19 at 20:53 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随波逐刘

新虫 (小有名气)

样品量是多少,太多了容易降解的。。。跑RNA的时候电压高点,200V吧,时间短点,10-15min可以了
17楼2013-09-07 16:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

15879003030

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这是RNA吗?少了一条带啊。

为什么不用热酚法抽RNA,你这个方法我没用过不知道效果。
2楼2013-08-19 21:06:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15879003030

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 15879003030 at 2013-08-19 21:06:37
这是RNA吗?少了一条带啊。

为什么不用热酚法抽RNA,你这个方法我没用过不知道效果。

附上我这里跑RNA的图
琼脂糖电泳rna ,跑成这样,是怎么回事?求指导-1
rna.jpg

3楼2013-08-19 21:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yimingwang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-08-20 18:34:33
和抽提没有太大关系,样品已降解。你用的方法是公司的标准方法。但是,建议 8、中剧烈震荡。改为轻轻上下翻转2次。
Let'sdoit.
4楼2013-08-19 21:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +14 勒布朗@ 2026-03-31 19/950 2026-04-02 00:01 by 勒布朗@
[考研] 318求调剂,计算材料方向 +7 吸喵有害笙命 2026-04-01 8/400 2026-04-01 23:54 by 义文wang
[考研] 11408 321分求调剂 +3 huchun12138 2026-03-30 4/200 2026-04-01 22:48 by guanxin1001
[考研] 求调剂推荐 材料 304 +21 荷包蛋hyj 2026-03-26 21/1050 2026-04-01 21:09 by lijunpoly
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-30 16/800 2026-04-01 17:58 by 邱gl
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-27 6/300 2026-04-01 16:13 by yanflower7133
[考研] 309求调剂 +19 谁不是少年 2026-03-29 19/950 2026-04-01 15:47 by jp9609
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +7 @taotao 2026-03-30 7/350 2026-04-01 14:30 by chenqifeng666
[硕博家园] 考研调剂 +5 骆驼男人 2026-04-01 5/250 2026-04-01 14:28 by syjjj0321
[考研] 311(085601)求调剂 +12 liziyeyeye 2026-03-28 13/650 2026-04-01 00:34 by fmesaito
[考研] 336材料求调剂 +10 陈滢莹 2026-03-26 12/600 2026-03-31 17:59 by jp9609
[考研] 266分,求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-29 3/150 2026-03-31 10:06 by cal0306
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 08工科,295,接受跨专业调剂 +6 lmnlzy 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 本科211总分289,08工学真心求调剂 +3 utopiaE 2026-03-30 3/150 2026-03-30 23:42 by ms629
[考研] 293求调剂 +3 末未mm 2026-03-30 5/250 2026-03-30 17:23 by 王保杰33
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 2026年华南师范大学欢迎化学,化工,生物,生医工等专业优秀学子加入! +3 llss0711 2026-03-28 6/300 2026-03-29 10:26 by llss0711
[考研] 药学105500求调剂 +3 Ssun。。 2026-03-28 3/150 2026-03-28 11:24 by lxf170613
信息提示
请填处理意见