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想测金属和蛋白结合后的紫外吸收峰变化，用什么溶剂好？
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我想通过看蛋白加了金属后紫外吸收峰的变化来确定是否此金属能结合到蛋白上。做了一次实验，用Tris-HCl 做溶剂，测出来好多峰，和文献上的不一样，而且没有找到特异的峰，文献上用的hepes buffer,所以我又换成hepes，但是我的金属二价铜溶在hepes里时变成了不透明的淡蓝色，稀释以后变透明了。用hepes做了后发现几乎和Tris一样，还是很多峰。请问这正常吗？我到底该用怎样的溶剂比较好？另外：文献上说265nm是一价铜与蛋白结合形成的硫醇盐的特异的峰，那我做的是二价铜，最大峰应该在哪儿呢？ 第一张图是两种Buffer单独测的紫外吸收。第二张是用hepes里溶了二价铜测的值与单独hepes的值放在一起。  DI4{0]H)VSV4%HKY~QM9A{K.jpg  ~)V_T)L]2MDTOC8NNB25B(Q.jpg |
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