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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 单菌落已形成，该怎样分子生物学鉴定呀
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生物小王子

木虫 (正式写手)

[求助] 单菌落已形成，该怎样分子生物学鉴定呀

想问下友人，我们做了个社会实践，牛奶中相关微生物的检测与鉴定，现在已经在平板上已经分离出了单菌落，接下来的分子生物学鉴定是我们的盲区，是不是在这之前要挑菌到液体培养基中扩大培养？同仁们可以在分子生物学的相关步骤给我们一个思路，还有真菌是不是依据形体特征就可以大致鉴定了，而分子生物学手段同样对真菌适用么？还有微生物生理生化反应都需要在哪些方面进行鉴定呀？
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1楼 2013-08-11 11:49:41
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莓林塔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-11 23:23:27
生物小王子: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-12 12:52:41
做过细菌的，细菌是鉴定16S rDNA，真菌应该是鉴定rDNA的ITS序列吧，应该也是有通用引物，提基因组P这段序列，然后送测序去NCBI上比就好了~~
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2楼2013-08-11 21:17:38
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莓林塔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不过应该也就能鉴定到属，种的话应该还要更多的生理生化反应，我就不会咯~~
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3楼2013-08-11 21:19:08
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小小亚杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2013-08-11 23:23:42
生物小王子: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-08-12 12:53:34
通过分子生物学手段鉴定一般需要抽提菌株的基因组，所以要先挑菌到液体培养基中扩大培养。
然后普通的细菌通过16s引物PCR鉴定，真菌通过18s引物鉴定，这些引物文献中都有，你可以找一下。
如果有实验条件，可以再对菌株进行微生物生理生化指标的检测，我记得以前微生物实验的书上就有，或者你找两篇文献看看，参考一下伯杰氏系统分类手册。
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4楼2013-08-11 22:08:24
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生物小王子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 莓林塔 at 2013-08-11 21:19:08
不过应该也就能鉴定到属，种的话应该还要更多的生理生化反应，我就不会咯~~

非常感谢
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我就是我，人间不一样的烟火
5楼2013-08-12 12:53:12
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生物小王子

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小小亚杰 at 2013-08-11 22:08:24
通过分子生物学手段鉴定一般需要抽提菌株的基因组，所以要先挑菌到液体培养基中扩大培养。
然后普通的细菌通过16s引物PCR鉴定，真菌通过18s引物鉴定，这些引物文献中都有，你可以找一下。
如果有实验条件，可以再 ...

非常感谢
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我就是我，人间不一样的烟火
6楼2013-08-12 12:53:56
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