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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问，丝状真菌胞外蛋白质组蛋白含量太低，SDS-PAGE不出条带怎么办？
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clisu

新虫 (小有名气)

[求助] 请问，丝状真菌胞外蛋白质组蛋白含量太低，SDS-PAGE不出条带怎么办？

请问，丝状真菌胞外蛋白质组蛋白含量太低，SDS-PAGE不出条带怎么办？
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1楼 2013-08-08 10:47:47
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shiq250

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人看法：1，增加样品。2，不冻干直接提取蛋白。3，Flamingo染色提高敏感度
如果可能，希望你能提供详细一些的蛋白提取方法
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4楼2013-08-09 17:09:50
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多一点浓缩一下，银染，看能否看到
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2楼2013-08-08 14:33:50
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clisu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-08-08 14:33:50
多一点浓缩一下，银染，看能否看到

发酵液离心去菌丝后冻干又溶解的，还是不行，冻干后再溶解有黏黏的糖类物质  不知是否这种东西影响出条带


发酵体系中有淀粉为碳源，菌种为产糖化酶的霉菌
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3楼2013-08-09 16:50:24
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
clisu: 金币+5, ★有帮助 2013-08-16 09:25:48
引用回帖:
3楼: Originally posted by clisu at 2013-08-09 16:50:24
发酵液离心去菌丝后冻干又溶解的，还是不行，冻干后再溶解有黏黏的糖类物质  不知是否这种东西影响出条带


发酵体系中有淀粉为碳源，菌种为产糖化酶的霉菌...

发酵液离心去菌丝后冻干。去除菌之后，直接冻干的培养基？那么培养基里面的成分会影响你电泳，培养基里的东西比你表达的蛋白还要高很多。个人建议你富集一下吧，用个亲和层析柱。然后再跑胶。个人建议，仅供参考。
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5楼2013-08-09 17:10:01
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