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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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clisu

新虫 (小有名气)

[求助] 请问,丝状真菌胞外蛋白质组蛋白含量太低,SDS-PAGE不出条带怎么办?

请问,丝状真菌胞外蛋白质组蛋白含量太低,SDS-PAGE不出条带怎么办?
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多一点浓缩一下,银染,看能否看到
2楼2013-08-08 14:33:50
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clisu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-08-08 14:33:50
多一点浓缩一下,银染,看能否看到

发酵液离心去菌丝后冻干又溶解的,还是不行,冻干后再溶解有黏黏的糖类物质  不知是否这种东西影响出条带


发酵体系中有淀粉为碳源,菌种为产糖化酶的霉菌
3楼2013-08-09 16:50:24
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shiq250

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人看法:1,增加样品。2,不冻干直接提取蛋白。3,Flamingo染色提高敏感度
如果可能,希望你能提供详细一些的蛋白提取方法
4楼2013-08-09 17:09:50
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ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
clisu: 金币+5, 有帮助 2013-08-16 09:25:48
引用回帖:
3楼: Originally posted by clisu at 2013-08-09 16:50:24
发酵液离心去菌丝后冻干又溶解的,还是不行,冻干后再溶解有黏黏的糖类物质  不知是否这种东西影响出条带


发酵体系中有淀粉为碳源,菌种为产糖化酶的霉菌...

发酵液离心去菌丝后冻干。去除菌之后,直接冻干的培养基?那么培养基里面的成分会影响你电泳,培养基里的东西比你表达的蛋白还要高很多。个人建议你富集一下吧,用个亲和层析柱。然后再跑胶。个人建议,仅供参考。
5楼2013-08-09 17:10:01
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