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王小蒙602

新虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 马海云 at 2014-07-21 08:48:56
我的是洗过之后还是有杂带,没找到原因呢...

加SDS或者用低浓度的尿素来洗
11楼2014-07-21 13:05:36
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Sthunder

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 马海云 at 2014-07-21 08:46:56
奥,这个我是知道的,可是我的最终沉淀跑胶发现杂带还是很多,每次洗涤的上清跑胶发现根本没有东西,这是什么原因呢?...

上清没东西,说明可溶蛋白已经没了,接下来就过柱就好!如果你过柱后所得蛋白还是多带的话,就有可能是多聚体,或者纯化过程需要改进
互助互励,共奋共进!!
12楼2014-07-22 00:41:39
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马海云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 王小蒙602 at 2014-07-21 13:05:36
加SDS或者用低浓度的尿素来洗...

我之前洗就是用尿素,就是没洗干净。现在找到原因了,是超声破碎次数太少,没有破碎完全。我的目的蛋白与菌体蛋白之间结合紧密,必须增加破碎次数才可以。
13楼2014-07-27 09:37:55
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马海云

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
12楼: Originally posted by Sthunder at 2014-07-22 00:41:39
上清没东西,说明可溶蛋白已经没了,接下来就过柱就好!如果你过柱后所得蛋白还是多带的话,就有可能是多聚体,或者纯化过程需要改进...

恩啊 我现在找到原因了,是超声破碎次数太少,没有破碎完全。我的目的蛋白与菌体蛋白之间结合紧密,破碎次数少,没有分开所以洗的时候不容易洗下来!
14楼2014-07-27 09:39:40
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