【答案】应助回帖

11楼2014-07-21 13:05:36

Sthunder

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9楼: Originally posted by 马海云 at 2014-07-21 08:46:56
奥，这个我是知道的，可是我的最终沉淀跑胶发现杂带还是很多，每次洗涤的上清跑胶发现根本没有东西，这是什么原因呢？...

上清没东西，说明可溶蛋白已经没了，接下来就过柱就好！如果你过柱后所得蛋白还是多带的话，就有可能是多聚体，或者纯化过程需要改进

互助互励，共奋共进！！

12楼2014-07-22 00:41:39

马海云

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11楼: Originally posted by 王小蒙602 at 2014-07-21 13:05:36
加SDS或者用低浓度的尿素来洗...

我之前洗就是用尿素，就是没洗干净。现在找到原因了，是超声破碎次数太少，没有破碎完全。我的目的蛋白与菌体蛋白之间结合紧密，必须增加破碎次数才可以。

13楼2014-07-27 09:37:55

马海云

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【答案】应助回帖

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12楼: Originally posted by Sthunder at 2014-07-22 00:41:39
上清没东西，说明可溶蛋白已经没了，接下来就过柱就好！如果你过柱后所得蛋白还是多带的话，就有可能是多聚体，或者纯化过程需要改进...

恩啊我现在找到原因了，是超声破碎次数太少，没有破碎完全。我的目的蛋白与菌体蛋白之间结合紧密，破碎次数少，没有分开所以洗的时候不容易洗下来！

14楼2014-07-27 09:39:40