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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)

[求助] 732钠型阳离子树脂分离生物碱

我正在做一个薄层鉴别,是用732钠型阳离子树脂分离生物碱,我的产品中含有甜菜碱和水苏碱,我按照药典鉴别水苏碱的方法进行分离:样品用水溶解,调ph为2,上样后用蒸馏水洗脱至洗脱液无色,然后用氨试液(2稀释到13)150ml洗脱,薄层鉴别发现只有对照品有颜色,供试品没有显色;后面我就把碱性洗脱液换成氨试液,薄层鉴别时发现供试品色谱的斑点与甜菜碱一致,水苏碱颜色深一点,高度矮3mm,请教大家,这是什么原因?要怎么改进?
732钠型阳离子树脂分离生物碱
20130730713_副本.jpg


732钠型阳离子树脂分离生物碱-1
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sailorgg10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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天蓝晴: 金币+2, 有帮助 2013-07-31 23:37:52
分析原因:样品调pH后,水苏碱呈离子状态,过树脂柱后被吸附在柱子上。刚开始你用碱试液洗脱,可能碱性不够,没能把水苏碱洗脱下来,因此薄层色谱没有显色。氨试液的碱性强,所以能够洗脱。
你直接用氨试液洗脱液点板,薄层色谱效果坑可能不好,因为水溶液点板,斑点会扩散,或者拖尾。建议把氨试液蒸干后用有机溶剂溶解后再点板。不知道你的水苏碱对照品是用什么溶剂溶解的?
4楼2013-07-31 15:03:20
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james_yy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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天蓝晴: 金币+2, 有帮助 2013-07-30 23:07:15
树脂一般的分离度都比较差,如果是分离生物碱与非生物碱,那是可以的,如果分离2个极性差不多的生物碱,还是用HPLC的离子交换柱吧
2楼2013-07-30 21:31:40
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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by james_yy at 2013-07-30 21:31:40
树脂一般的分离度都比较差,如果是分离生物碱与非生物碱,那是可以的,如果分离2个极性差不多的生物碱,还是用HPLC的离子交换柱吧

暂时还不想换柱子,我们以前用的是中性氧化铝柱,能鉴别出水苏碱,只是比较耗时,所以想换成阳离子树脂柱。
3楼2013-07-30 23:08:29
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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sailorgg10 at 2013-07-31 15:03:20
分析原因:样品调pH后,水苏碱呈离子状态,过树脂柱后被吸附在柱子上。刚开始你用碱试液洗脱,可能碱性不够,没能把水苏碱洗脱下来,因此薄层色谱没有显色。氨试液的碱性强,所以能够洗脱。
你直接用氨试液洗脱液点 ...

氨试液洗脱液收集后是蒸干了的,用的是70%乙醇溶解点样,水苏碱对照品用的是无水乙醇溶解,展开剂是丙酮-无水乙醇-盐酸(10:6:1).今天试了个丙酮-无水乙醇-盐酸(10:8:1),水苏碱与甜菜碱对照品仍然相差不远,样品依然和甜菜碱对的比较齐,曾经将水苏碱和甜菜碱混合点样,混合点与甜菜碱的点一致,所以很难确定供试品中有没有水苏碱。因为甜菜碱是另一味药带入的,所以今天做了个阴性样品,明天再试一下。
5楼2013-07-31 23:37:30
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