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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)

[求助] 732钠型阳离子树脂分离生物碱

我正在做一个薄层鉴别，是用732钠型阳离子树脂分离生物碱，我的产品中含有甜菜碱和水苏碱，我按照药典鉴别水苏碱的方法进行分离：样品用水溶解，调ph为2，上样后用蒸馏水洗脱至洗脱液无色，然后用氨试液（2稀释到13）150ml洗脱，薄层鉴别发现只有对照品有颜色，供试品没有显色；后面我就把碱性洗脱液换成氨试液，薄层鉴别时发现供试品色谱的斑点与甜菜碱一致，水苏碱颜色深一点，高度矮3mm，请教大家，这是什么原因？要怎么改进？
732钠型阳离子树脂分离生物碱
20130730713_副本.jpg


732钠型阳离子树脂分离生物碱-1
20130730717_副本.jpg
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1楼 2013-07-30 20:49:37
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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by james_yy at 2013-07-30 21:31:40
树脂一般的分离度都比较差，如果是分离生物碱与非生物碱，那是可以的，如果分离2个极性差不多的生物碱，还是用HPLC的离子交换柱吧

暂时还不想换柱子，我们以前用的是中性氧化铝柱，能鉴别出水苏碱，只是比较耗时，所以想换成阳离子树脂柱。
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3楼2013-07-30 23:08:29
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james_yy

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天蓝晴: 金币+2, ★有帮助 2013-07-30 23:07:15
树脂一般的分离度都比较差，如果是分离生物碱与非生物碱，那是可以的，如果分离2个极性差不多的生物碱，还是用HPLC的离子交换柱吧
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2楼2013-07-30 21:31:40
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sailorgg10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
天蓝晴: 金币+2, ★有帮助 2013-07-31 23:37:52
分析原因：样品调pH后，水苏碱呈离子状态，过树脂柱后被吸附在柱子上。刚开始你用碱试液洗脱，可能碱性不够，没能把水苏碱洗脱下来，因此薄层色谱没有显色。氨试液的碱性强，所以能够洗脱。
你直接用氨试液洗脱液点板，薄层色谱效果坑可能不好，因为水溶液点板，斑点会扩散，或者拖尾。建议把氨试液蒸干后用有机溶剂溶解后再点板。不知道你的水苏碱对照品是用什么溶剂溶解的？
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4楼2013-07-31 15:03:20
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天蓝晴

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sailorgg10 at 2013-07-31 15:03:20
分析原因：样品调pH后，水苏碱呈离子状态，过树脂柱后被吸附在柱子上。刚开始你用碱试液洗脱，可能碱性不够，没能把水苏碱洗脱下来，因此薄层色谱没有显色。氨试液的碱性强，所以能够洗脱。
你直接用氨试液洗脱液点 ...

氨试液洗脱液收集后是蒸干了的，用的是70%乙醇溶解点样，水苏碱对照品用的是无水乙醇溶解，展开剂是丙酮-无水乙醇-盐酸（10:6:1）.今天试了个丙酮-无水乙醇-盐酸（10:8:1），水苏碱与甜菜碱对照品仍然相差不远，样品依然和甜菜碱对的比较齐，曾经将水苏碱和甜菜碱混合点样，混合点与甜菜碱的点一致，所以很难确定供试品中有没有水苏碱。因为甜菜碱是另一味药带入的，所以今天做了个阴性样品，明天再试一下。
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5楼2013-07-31 23:37:30
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