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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

[交流] 植物生理的几个常用参数测定，探讨最优方案

近日做一个病害防治的效果评估，需要测定植物生理中几个参数：水势、K+、叶绿素、丙二醛、过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性、多酚氧化酶活性、超氧化物歧化酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性，但参考的植物生理实验技术（王学奎主编，北京，高等教育出版社，2006）中有关几个酶活性测定方法对于PBS的要求有多个，其中过氧化物酶活测定用0.05mol/L PH=5.5PBS，过氧化氢酶则用0.2mol/LPH=7.8PBS,SOD活性测定用0.05mol/LPH=7.8PBS,PAL测定则使用0.05mol/LPH=8.8硼酸缓冲液......实验需要对药剂处理后的病株叶片进行参数分析，以上方法则会消耗较多病叶，消耗较多病叶会对植病调查结果产生影响，探讨在一种缓冲条件下，同时测定以上多个参数的方法。
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1楼 2013-07-29 19:17:27
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★
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hkqgeoffrey: 金币+1, 想法很好，但是对于方法的误差评估尚缺少准确分析证明 2013-07-30 00:06:11
可以考虑用同一个PH的缓冲液提取，检测时，再分别配置不同的缓冲液提供PH环境，由于加入最终反应体系的样品液很少，对PH的干扰基本可以忽略不计。
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2楼2013-07-29 22:08:04
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-07-29 22:08:04
可以考虑用同一个PH的缓冲液提取，检测时，再分别配置不同的缓冲液提供PH环境，由于加入最终反应体系的样品液很少，对PH的干扰基本可以忽略不计。

该想法考虑过提取时使用PH=7.0的缓冲液，但担心由于缓冲体系的问题对酶活性产生破坏
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3楼2013-07-30 00:01:55
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by hkqgeoffrey at 2013-07-30 00:01:55
该想法考虑过提取时使用PH=7.0的缓冲液，但担心由于缓冲体系的问题对酶活性产生破坏...

我没有文献能够具体说明，但从自己的经验来看，至少楼主列出的几种活性氧相关酶，用ph7磷酸盐缓冲液提取，对活性没有显著性影响。
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4楼2013-07-31 06:03:19
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landsay2011

铁虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
hkqgeoffrey: 金币+2, 鼓励关心，谢谢发帖回复 2013-08-29 14:15:09
建议PBS7.8  我做过MDA SOD POD CAT 用的是7.8 的 身边也有人用7.0的
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5楼2013-08-28 21:00:58
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hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by landsay2011 at 2013-08-28 21:00:58
建议PBS7.8  我做过MDA SOD POD CAT 用的是7.8 的 身边也有人用7.0的

谢谢回复，我测参数是为观察药物病理效用，我仔细想过，只要我的对照和测定组都在一个PH下完成应该不影响结果，谢谢关心
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6楼2013-08-29 14:14:16
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