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植物生理的几个常用参数测定,探讨最优方案
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hkqgeoffrey
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植物生理的几个常用参数测定,探讨最优方案
近日做一个病害防治的效果评估,需要测定植物生理中几个参数:水势、K+、叶绿素、丙二醛、过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性、多酚氧化酶活性、超氧化物歧化酶活性、苯丙氨酸解氨酶活性,但参考的植物生理实验技术(王学奎主编,北京,高等教育出版社,2006)中有关几个酶活性测定方法对于PBS的要求有多个,其中过氧化物酶活测定用0.05mol/L PH=5.5PBS,过氧化氢酶则用0.2mol/LPH=7.8PBS,SOD活性测定用0.05mol/LPH=7.8PBS,PAL测定则使用0.05mol/LPH=8.8硼酸缓冲液......实验需要对药剂处理后的病株叶片进行参数分析,以上方法则会消耗较多病叶,消耗较多病叶会对植病调查结果产生影响,探讨在一种缓冲条件下,同时测定以上多个参数的方法。
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hkqgeoffrey: 金币+1, 想法很好,但是对于方法的误差评估尚缺少准确分析证明
2013-07-30 00:06:11
可以考虑用同一个PH的缓冲液提取,检测时,再分别配置不同的缓冲液提供PH环境,由于加入最终反应体系的样品液很少,对PH的干扰基本可以忽略不计。
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2013-07-29 22:08:04
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starseacow
at 2013-07-29 22:08:04
可以考虑用同一个PH的缓冲液提取,检测时,再分别配置不同的缓冲液提供PH环境,由于加入最终反应体系的样品液很少,对PH的干扰基本可以忽略不计。
该想法考虑过提取时使用PH=7.0的缓冲液,但担心由于缓冲体系的问题对酶活性产生破坏
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2013-07-30 00:01:55
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hkqgeoffrey
at 2013-07-30 00:01:55
该想法考虑过提取时使用PH=7.0的缓冲液,但担心由于缓冲体系的问题对酶活性产生破坏
...
我没有文献能够具体说明,但从自己的经验来看,至少楼主列出的几种活性氧相关酶,用ph7磷酸盐缓冲液提取,对活性没有显著性影响。
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4楼
2013-07-31 06:03:19
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hkqgeoffrey: 金币+2, 鼓励关心,谢谢发帖回复
2013-08-29 14:15:09
建议PBS7.8 我做过MDA SOD POD CAT 用的是7.8 的 身边也有人用7.0的
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2013-08-28 21:00:58
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5楼
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Originally posted by
landsay2011
at 2013-08-28 21:00:58
建议PBS7.8 我做过MDA SOD POD CAT 用的是7.8 的 身边也有人用7.0的
谢谢回复,我测参数是为观察药物病理效用,我仔细想过,只要我的对照和测定组都在一个PH下完成应该不影响结果,谢谢关心
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6楼
2013-08-29 14:14:16
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