应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求问提取质粒时为什么总是由总DNA？
51/1返回列表
查看: 1055  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓

[交流] 求问提取质粒时为什么总是由总DNA？

我近来提取低拷贝质粒（<5）时，电泳检测总是有总DNA条带，酶切验证不是质粒的单独片段，确实存在总DNA。我试过多种方法，如：重新配制溶液，重新纯化菌体，严格实验操作等，但还是有总DNA。比较不幸的是，用同样的材料和方法提取高拷贝的质粒时，居然也出现了总DNA！甚为困惑！
     请高手指点！！
     谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2007-11-05 09:25:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
引用回帖:
Originally posted by jiasanlin at 2007-11-5 17:56:
如果是碱裂解发提取质粒的时候，一般裂解时间长的化就会混入genome DNA,一般情况下加入溶液2后只要看到菌液清亮，就要马上加入溶液3 终止。变清亮的时间跟收集菌体的量和溶液2的用量有关，分子克隆手册上的不要超 ...

谢谢！
我已经注意这个问题了，但效果还是不理想！！
赞一下 回复此楼
6楼2007-11-06 08:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

asr

荣誉版主 (知名作家)
你用的什么方法呢?

碱法还是CTAB?方法不同,需要注意的是不一样的.
赞一下 回复此楼
思想极度邪恶，勿怕勿怪！\(^o^)/~
2楼2007-11-05 12:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiasanlin

金虫 (小有名气)
★
johnsooh(金币+1,VIP+0):1悬浮起来,2澄清透明了,3出现絮状沉淀,2,3步骤要注意3楼的意见
如果是碱裂解发提取质粒的时候，一般裂解时间长的化就会混入genome DNA,一般情况下加入溶液2后只要看到菌液清亮，就要马上加入溶液3 终止。变清亮的时间跟收集菌体的量和溶液2的用量有关，分子克隆手册上的不要超过5分钟，只是一个大概的时间。
赞一下(10人) 回复此楼
3楼2007-11-05 17:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
楼上的朋友说的很对，前三步越快越好，并且动作一定要轻柔，不然会造成大量的基因组DNA断裂。
赞一下 回复此楼
内生菌资源和核酸分子的利用
4楼2007-11-06 08:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-18 8/400 2026-03-20 12:12 by 学员8dgXkO
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！ +3 lemonzzn 2026-03-17 4/200 2026-03-20 11:04 by lemonzzn
[考研] 材料080500调剂求收留 +6 一颗meteor 2026-03-13 6/300 2026-03-20 10:41 by EBSD
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-03-18 5/250 2026-03-20 09:00 by ZHANG0tao
[考研] 329求调剂 +6 想上学吖吖 2026-03-19 6/300 2026-03-20 09:00 by 每天只摆一小会
[论文投稿] 申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 318求调剂 +3 Yanyali 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:41 by houyaoxu
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭