10楼: Originally posted by 孙妙妙 at 2013-07-28 16:29:52
半定量是需要摸索循环数加样量及退火温度的，你内参的引物应该是没有问题的，但你那个亮度，一看就是超过阈值很多，一般内参22-26个循环最多了。我说的引物有问题的是你的目的基因引物，我们一般做出来都是只有1条 ...

12楼: Originally posted by grape_vine at 2013-07-29 08:15:00
我看很多人都说了35个循环有点多,但是从楼主的图来看, 确实不多.再少估计就扩增不出来了.
引物的特异性应该是有问题的. 不知道你59度的结果怎么样, 如果不行 还是要调整PCR反映体系.不知道你用的是什么mix, 质量如 ...

13楼: Originally posted by 学术问题 at 2013-07-29 08:36:11
59度  什么都没有  我都无语了...