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Q柱纯化一个蛋白出现的问题，氯化钠洗脱浓度一变就出现降解
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手上在做一个蛋白，极易降解，现在已经摸索出上样后一直用0.1M的氯化钠冲洗近30个柱体积才勉勉强强把蛋白从柱子上冲下来，其中前几个柱体积冲下来的是有降解条带的，后面冲下来的没有降解。 后来也实验了，用0.1M氯化钠冲洗几个柱体积后，理论上应该已经把降解条带冲干净了，再换到0.5M氯化钠来冲洗，但是结果下来还是含有很多的降解条带，这是怎么回事呢？ Q柱在上样过程中顶部的胶回变灰，是不是损坏胶了？我的工作液中一直有尿素，Q能长时间有尿素吗？ 还是Q柱被金属污染了，有看到有本书里说离子交换柱被金属污染了就会顶部变蓝色或者灰色，可以用几倍体积的饱和EDTA+10mM的盐酸ph2来处理柱子，Q能奈受这么低的ph吗？记得实验室师兄说Q不能用酸处理的。 Q柱大家是怎么再生的，有办法除上面结合的色素吗？ |
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