| 查看: 1912 | 回复: 1 | ||
景中人金虫 (小有名气)
|
[求助]
TAP培养基配制问题 已有1人参与
|
|
有没有配过TAP培养基的，我按照如下的配方配制之后，第一次养莱茵衣藻，接种的量比较少，没有长起来。第二次又配制了一次，测了一下PH是4点多。我的疑问是，Tris不是可以缓冲的么，如果不可以缓冲，那肯定是要用氢氧化钠或钾调节PH的，那何不直接加乙酸钠呢？ TAP培养基配方： Make the following stock solutions: 1. TAP salts 2. phosphate solution NH4Cl 15.0 g MgSO4 . 7H2O 4.0 g CaCl2 . 2H2O 2.0 g water to 1 liter K2HPO4 28.8 g KH2PO4 14.4 g water to 100 ml 3. Hutner's trace elements For 1 liter final mix, dissolve each compound in the volume of water indicated. The EDTA should be dissolved in boiling water, and the FeSO4 should be prepared last to avoid oxidation. compound amount water EDTA disodium salt 50 g 250 ml ZnSO4 . 7 H2O 22 g 100 ml H3BO3 11.4 g 200 ml MnCl2 . 4 H2O 5.06 g 50 ml CoCl2. 6 H2O 1.61 g 50 ml CuSO4 . 5 H2O 1.57 g 50 ml (NH4)6Mo7O24. 4 H2O 1.10 g 50 ml FeSO4. 7 H2O 4.99 g 50 ml Mix all solutions except EDTA. Bring to boil, then add EDTA solution. The mixture should turn green. When everything is dissolved, cool to 70 degrees C. Keeping temperature at 70, add 85 ml hot 20% KOH solution (20 grams / 100 ml final volume). Do NOT use NaOH to adjust the pH. Bring the final solution to 1 liter total volume. It should be clear green initially. Stopper the flask with a cotton plug and let it stand for 1-2 weeks, shaking it once a day. The solution should eventually turn purple and leave a rust-brown precipitate, which can be removed by filtering through two layers of Whatman#1 filter paper, repeating the filtration if necessary until the solution is clear. Store refrigerated or frozen convenient aliquots. Some people shorten the time for formation of the precipiate by bubbling the solution with filtered air. If no precipitate forms, the solution is still usable. However, you might want to check the pH in this case and adjust it to around 7.0 using either KOH or HCl as needed. To prepare sulfur-free trace elements for hydrogen generation, the sulfate salts can be replaced with equimolar chloride salts (ZnCl2 10.0 g; CuCl2 . 2 H2O 1.00 g; FeCl2 . 4 H2O, 3.60 g). . To make the final medium, mix the following: 2.42 g Tris 25 ml solution #1 (salts) 0.375 ml solution #2 (phosphate) 1.0 ml solution #3 (trace elements) 1.0 ml glacial acetic acid water to 1 liter For solid medium, add 15 g agar per liter. Autoclave. For Tris-minimal medium omit the acetic acid and titrate the final solution to pH 7.0 with HCl |
回复此楼» 猜你喜欢
求调剂院校信息
已经有4人回复
-
085600材料与化工306
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有10人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有9人回复
-
一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂
已经有4人回复
-
286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！
已经有8人回复
-
资源与环境 调剂申请(333分)
已经有5人回复
-
280求调剂
已经有12人回复
-
269专硕求调剂
已经有5人回复
-
材料学硕301分求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- B5培养基配方及配制方法
已经有9人回复
- MS培养基加水解酪蛋白如何灭菌，水解酪蛋白需单独配制灭菌吗？
已经有7人回复
- 毕赤酵母培养基配制试剂的采购问题
已经有7人回复
- 放线菌产孢退化
已经有13人回复
- 培养基配制问题
已经有12人回复
- 急急急!!!!含药培养基的配制
已经有5人回复
- 请问大家爱有谁知道停乳链球菌的培养基如何配置么？谢谢各位的帮助了
已经有6人回复
- 磷酸盐和氯化钙配制培养基产生沉淀是怎么回事啊
已经有12人回复
- 用作配制固体培养基的琼脂粉和琼脂条有何区别？对细菌生长影响如何？
已经有5人回复
- 麦芽汁--麸皮培养基怎么配制
已经有7人回复
- 配制培养基过程
已经有16人回复
- 怎样配制以油脂作为单一碳源的培养基
已经有8人回复
- 海水配制MC培养基为什么会有沉淀?(灭菌后)
已经有4人回复
- 配制培养基的原则
已经有10人回复
- 同时配制的玫瑰红钠培养基，颜色不同
已经有5人回复
- YPD培养基配制
已经有11人回复
- 含有L-半胱氨酸盐酸盐的培养基如何配制，L-半胱氨酸盐酸盐如何灭菌
已经有13人回复
- 【求助/交流】配制酪蛋白培养基 干酪素不溶解
已经有15人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母表达用培养基BMGY BMMY的详细配制方法，请赐教。
已经有14人回复
- 【求助/交流】请教配制孟加拉红培养基添加氯霉素的问题
已经有6人回复
- 【分享】培养基的配制
已经有20人回复
2楼2016-04-21 10:44:04
